大肠杆菌在发酵乳中生长繁殖浅谈-LQ.docxVIP

大肠杆菌在发酵型酸牛奶生长繁殖浅谈摘要：本文以发酵乳作为基础，其中添加一定浓度的以大肠杆菌为典型菌的大肠菌群，用以研究大肠杆菌在发酵乳中的生长情况。关键词：大肠杆菌 发酵型酸牛奶 生长情况一引言：发酵型酸牛奶大致可以分为三个品类：第一类是满足营养需求的基础酸奶；第二类是满足美味休闲的大果粒、谷物酸奶；第三类是健康功能酸奶，如通畅、免疫、儿童成长等。其中基础酸奶的市场规模占60%以上，果粒（谷物）酸奶和功能性酸奶的市场规模相对较低。因大肠杆菌对产品存在着污染隐患，现阶段没有相关文献说明大肠杆菌在发酵型酸牛奶中生长繁殖情况，为此，本文就大肠杆菌在发酵型酸牛奶生长情况进行了评述。二术语和定义：1.大肠菌群：在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。2.发酵乳fermented milk：以生牛（羊）乳或乳粉为原料，经杀菌、发酵后制成的pH 值降低的产品。3.大肠杆菌：广泛存在于人和温血动物的肠道中，能够在44.5℃发酵乳糖产酸产气，IMViC（靛基质、甲基红、VP实验、柠檬酸盐）生化实验为++--或-+--的革兰氏阴性杆菌。以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生状况，推断食品中肠道致病菌污染的可能性。三设备及试剂：1.温箱:36±1度2.冰箱:2-5度3.恒温水浴:46±1℃4.天平：感量0.01g5.均质器6.振荡器7.无菌培养皿:直径为90mm8.无菌吸管：1ml(具0.01ml刻度)9.无菌锥形瓶:容量为500ml10.移液器：20-200ul培养基和试剂:1.结晶紫中性红胆盐琼脂2.煌绿乳糖胆盐肉汤3.无菌生理盐水4.无菌1mol/lNaOH和1mol/lHCL四 实验方法1收集发酵型酸牛奶，以大肠杆菌作为大肠菌群的典型菌落，其中添加10ml的复溶大肠杆菌(菌种编号为CCTCC AB91112)于样品中；2进行震荡混匀，36℃培养24小时后待检；3每隔24小时进行检测1次大肠菌群，同时检测样品的酸度和PH值；4 具体操作步骤:（1）称取25g混匀样品于25ml装有玻璃珠的无菌生理盐水中，用无菌1mol/lNaOH和1mol/lHCL调节PH在6.5-7.5之间，制成1:1稀释液。（2）取2份2ml稀释样品接种2个无菌平皿（1:1稀释时，每皿2ml等同于吸取原液1ml）,同时，分别取2ml生理盐水加入两个无菌平皿作空白对照。（3）及时将18-20ml冷至46℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)倾注于每个平皿中。小心选择平皿，待培养基于样品溶液充分混匀，凝固后，按照GB 4789.3—2010《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法大肠菌群平板计数法再加3ml-4mlVRBA 覆盖平板表层，翻转平板，置于36℃±1℃培养18-24h。（4）同时取待检样品若干检测样品的酸度和PH值。5证实实验从VRBA平板上提取10个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于10个BGLB肉汤管内，36±1℃培养14-48h,观察产气情况，凡BGLB肉汤管产气，即报告为大肠菌群阳性。四.检测结果及分析：1、检测酸性样品1-5#大肠菌群项目，同时检测样品的酸度和PH值，结果如下：天数样品号大肠菌群结果（CFU/g）酸度（°T）PH值第1天产品-119000093.53.97产品-220000093.63.99产品-3170000943.96产品-441000943.96产品63.95第2天产品93.95产品63.95产品73.95产品-450092.23.96产品-5100092.13.96第3天产品-1420088.03.98产品-2130089.43.95产品-3550088.53.96产品-437089.53.95产品-578089.83.94第4天产品-146091.33.94产品-253091.93.95产品-3110090.23.92产品-46091.93.94产品-520092.33.93第5天产品-1092.53.94产品-22091.93.94产品-34091.63.94产品-41090.69.95产品-5091.83.96第6天产品-1792.63.96产品-211091.93.93产品-315092.73.95产品-4691.73.96产品-52592.33.94第7天产品-1292.33.88产品-25691.93.88产品-3110933.88产品-4393.13.86产品-5691.53.91第8天产品-1193.03.89产品-21791.03.88产品-35893.03.89产品-4192.43.88产品-5391.93.91第9天产品-1091.33.93产品-2391.23.92产品-3359