增龄相关髓源性抑制细胞在老年肺癌肿瘤免疫逃逸中的作用和机制研究.pdf

增龄相关髓源性抑制细胞在老年肺癌肿瘤免疫逃逸中的作用及机制研究 中文摘要 增龄相关髓源性抑制细胞在老年肺癌 肿瘤免疫逃逸中的作用及机制研究 中文摘要 目的目的 髓源性抑制细胞 (Myeloid-derived suppressor cells，MDSCs) 具有强 目的目的 的免疫抑制功能，在肿瘤免疫逃逸中发挥关键作用。近年研究认为，MDSCs 参与增龄 相关肿瘤的发生、发展，但其机制尚不清楚。本课题以青年小鼠MDSCs 为对照，研究 生理状态下老年小鼠 MDSCs 水平变化和生物学功能特点，探讨增龄相关MDSCs 在老年 肺癌肿瘤免疫逃逸中的作用及机制。 方法方法 通过皮下移植瘤技术构建青年 （2 月龄）、老年 （18 月龄）C57BL/6 小鼠的 方法方法 Lewis 肺癌模型，观察并记录青、老年小鼠肿瘤的生长情况，绘制肿瘤生长曲线；流 式细胞学技术检测健康青、老年小鼠脾脏 CD11b+ + GR-1 MDSCs 的水平及肿瘤进展过程中 荷瘤老年小鼠脾脏 CD11b+ + GR-1 MDSCs 的动态变化；采用免疫磁珠分选法分选健康青、 + + + + 老年小鼠脾脏 CD11b GR-1 MDSCs,体外 T 细胞增殖实验探索老年小鼠 CD11b GR-1 + + MDSCs 免疫功能的特点，体内过继转输实验探索老年小鼠 CD11b GR-1 MDSCs 在肿瘤 免疫逃逸中的作用。通过Trans-well 实验、体内 B7-H1 阻断实验进一步研究老年小 + + 鼠 CD11bGR-1 MDSCs 发挥免疫抑制作用、介导肿瘤免疫逃逸的机制。 结果结果 (1)成功建立青年 （2 月龄）、老年 （18 月龄）C57BL/6 小鼠的Lewis 肺癌 结果结果 模型，经测量发现，与健康青年小鼠相比，健康老年小鼠体内更易于 Lewis 肺癌的发 生发展；(2)流式检测发现，与健康青年小鼠相比，健康老年小鼠脾脏CD11b+ + GR-1 MDSCs 水平明显升高 （10.53± 1.93% vs 2.37±0.75%，P0.01）；老年肺癌模型小 + + 鼠脾脏CD11b GR-1 MDSCs 伴随肿瘤的进展逐渐累积；(3)免疫磁珠法分选健康青、老 + + + + 年小鼠脾脏 CD1lb Gr-1 MDSCs，体外功能实验提示，青年小鼠CD1lb Gr-1 MDSCs 不能 + + 显著抑制 T 细胞增殖 （P=0.093），而老年小鼠 CD1lb Gr-1 MDSCs 可显著抑制 T 细胞增 I 中文摘要 增龄相关髓源性抑制细胞在