在胶质瘤干细胞中鞘氨醇激酶1对烷化剂敏感性的探究.pdfVIP

摘要 目的 应用诱导培养技术从人胶质瘤细胞系U87中诱导培养胶质瘤干细胞， 分析其生物学活性。研究在胶质瘤干细胞中鞘氨醇激酶与烷化剂敏感性关 系。应用鞘氨醇抑制剂诱导肿瘤干细胞分化增加烷化剂抗肿瘤效果，确定 鞘氨醇激酶为胶质瘤治疗的有效靶点。 方法 通过诱导培养技术从人胶质瘤细胞系U87当中诱导培养胶质瘤干细 胞。利用免疫荧光技术检测胶质瘤干细胞球CDl33和巢蛋白(Nestin)。应 用MTT试验检测胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞对烷化剂药物尼莫司丁 (ACNU)的敏感性。应用定量PCR技术比较胶质瘤干细胞和普通胶质瘤 细胞的鞘氨醇激酶l基因(SPHKl)表达差异。应用MTT试验和流式细胞仪 检测在胶质瘤干细胞和普通胶质瘤细胞中应用鞘氨醇激酶抑制剂(SKI)增加 肿瘤细胞对烷化剂药物尼莫司丁(ACNU)敏感性。 结果 试验表明应用诱导培养技术可以培养出典型的胶质瘤干细胞球。通过 MTT试验检测其对抗化疗药物的能力明显高于普通胶质瘤细胞。利用免疫 荧光技术检测到在胶质瘤干细胞出现CDl33和Nestin荧光标记。通过定量 PCR胶质瘤干细胞中鞘氨醇激酶l(SPHKl)基因表达明显高于普通胶质 瘤细胞。通过MTT试验和流式细胞仪检测，鞘氨醇激酶抑制剂(sⅪ)能 够明显增加肿瘤细胞对烷化剂药物(ACNU)敏感性。 结论 U87细胞中存在少量增殖、多向分化、抗烷化剂能力更强的胶质瘤干 细胞。鞘氨醇激酶是一个治疗肿瘤的有效靶点，通过应用鞘氨醇激酶抑制 剂可以诱导胶质瘤干细胞分化增加对烷化剂药物尼莫司丁(ACM，)的敏感 性促使细胞凋亡。 关键词：鞘氨醇激酶1；胶质瘤干细胞；耐药性；细胞分化；细胞凋亡 Abstract 1．Objective theculturefromthehuman celllineU87 cellsinthe Inductionof glioma glioma inducedcultureto the kinasethe analyzebiologicalactivity．Studysphingosine withthe in stem of ofrelations sensitivity alkylatinggliomacells．Application agent inhibitorsof increaseinduceddifferentiationofcancerstemcells sphingosine anti—ulmor kinaseidentifiedasaneffectivefor al】刚ating effect,Sphingosine target gliomatherapy． 2．Methods cellline stem were inductionfromhuman U87 cells induced By glioma glioma culture．DetectedimmunofluorescgnceballCDl33 stemcellsandnestin by glioma ofMTr of stemcellsand cellsto (Nestin)．Applicationassaygtioma glioma Division alkylating