土槿皮乙酸对青光眼成纤维细胞增殖抑制的实验探究.pdf

摘要 摘要 目的： 的增殖和凋亡的影响，并比较不同浓度及不同作用时间时，药物作用的强弱， 寻求辅助治疗和预防青光眼滤过手术后复发的新途径。 方法： 取材青光眼手术患者的结膜下Tenon’S囊组织，应用组织贴壁法进行成纤维 细胞的体外培养，传代后选取第三或第四代细胞。1．正常Tenon’S囊成纤维细 胞的鉴定：制备细胞爬片后对其进行HE染色，并用免疫组织化学SP法抗波形 蛋白抗体、抗波形蛋白抗体进行细胞鉴定。2．MTr比色法检测土槿皮乙酸对 化学SP法检测Bcl．2蛋白表达情况。 结果： 1．体外培养的正常人Tenon’S囊成纤维细胞，一般呈长梭形或三角形，胞核 呈椭圆形，位于细胞中央，胞浆丰富，生长能力旺盛，呈放射状、编织状、瀑 布状或螺旋状排列。 2．用免疫组织化学sP法染色传代后的第三或第四代成纤维细胞内，可见波 形蛋白表达呈阳性，角蛋白染色呈阴性。而波形蛋白的阳性表达位于细胞胞浆 内，可见与细胞长轴方向相同的棕黄色束状或者网状结构。 II 摘要 8．33％、1 86．81％、87．28％、88．38％、90．42％、91．2l％。当PAB浓度兰4umol／L，可见成纤 维细胞的增殖受到明显抑制(P0．05)。当PAB浓度在460umol／L的范围内， umol／L 抑制作用随着药物浓度的升高而加强(P0．05)。而当PAB浓度超过60 时，抑制作用升高不明显(PO．05)。药物作用成纤维细胞12,-一72h的时间内， 抑制作用随着作用时间的延长而加强，但当作用时间超过72h后，抑制作用增 加就不那么明显了，呈饱和效应动力学特征。其中当PAB作用72h，药物浓度 下成纤维细胞几乎凋亡。 组)，474-0．09％(4umol／L组)，21 4-0．64％(8umol／L组)，154-0．89％(1 24-0．25％ 6umol／L组)，1 下降，且经统计学分析，其抑制作用呈剂量依赖关系(P0．05)。 结论： PAB能显著抑制体外培养的HTCF的增殖，且该作用呈剂量和时间依赖性。 成为辅助治疗和预防青光眼滤过手术后复发的新型药物。 关键词：土槿皮乙酸；Tenon’S囊成纤维细胞；增殖抑制 I!I Abstract ABSTRACT ective： Obj and theeffectsof acid the Toobserve investigate pseudolaricB(PAB)on and ofculturedhuman Tenon’S capsule apoptosis subconjunctival proliferation differentconcentrationsthe fibroblasts(HTCF)invitro，between drug’Sstrength，in after fora treatmentandanew to recurrence ordertosearch auxiliary wayprevent filtering