小剂量放疗介导人肾透明细胞癌786-0免疫原性表达变化的探究.pdfVIP

摘 要 摘 要 目的：探讨小剂量放疗对人肾透明细胞癌786-0细胞免疫原性相关钙网蛋白 （CRT）、 MHC-I、MHC-II 表达量的影响，探索放疗对肿瘤细胞免疫源性的影响，为更好发挥放疗 与细胞免疫治疗的协同抗肿瘤效应，进一步提高肿瘤治疗疗效提供基本的实验数据。 方法：用 CCK-8 法检测放疗对 786-0 细胞的生长抑制作用；不同放射剂量作用于 786-0 细胞 24h 后，用流式细胞仪间接免疫荧光法检测细胞凋亡情况及膜表面的 CRT、 MHC-I、MHC-II分子的表达。 结果：1 CCK-8 检测结果：0Gy、6Gy、12 Gy、24 Gy 四组照射剂量对 786-0 细胞 增殖的抑制率均随着照射剂量的增加而加大。半数抑制照射剂量值（IC50）为：12Gy。 2 0Gy、6Gy、12 Gy、24 Gy 四组照射剂量对 786-0 细胞膜表面 CRT 表达的影响：四组 不同照射剂量对786-0细胞干预24h后，流式细胞仪检测细胞表面 CRT 的表达量，相应 的平均荧光强度分别为：对照组：CRT （0Gy）13.32%±2.01%；处理组：CRT （6Gy） 78.25%±5.83%；CRT（12Gy）202.24%±16.47%；CRT（24Gy）83.51%±8.26%。各组分 别与对照组两两相比，均有显著性差异（p0.001）。其中，以12Gy组作用最强，其次 为24Gy组，6Gy组作用相对最弱。随着照射剂量的增加，钙网蛋白的平均荧光强度先是 逐渐增高，后呈现下降趋势。12Gy 组与 6Gy 组和 24Gy 组两两比较均有显著差异（P 值 均0.05）。3 0Gy、6Gy、12 Gy、24 Gy四组照射剂量对786-0细胞膜表面MHC-I表达 的影响：四组不同照射剂量对 786-0 细胞干预 24h 后，流式细胞仪检测细胞表面 MHC-I 的表达量，相应的平均荧光强度分别为：对照组：MHC-I 8.24%±1. 25%；处理组：MHC-I （6Gy）16.26%±1.81%；MHC-I （12Gy）27.39%±2.43%；MHC-I （24Gy）48.72%±3.85%。 各实验组分别与对照组两两相比，有明显统计学差异（P 值均0.05），且MHC-I表达增 高随照射剂量增加而逐步上升，呈明显剂量依赖关系。4 0Gy、6Gy、12 Gy、24 Gy四组 照射剂量对 786-0 细胞膜表面 MHC-II 表达的影响：：四组不同照射剂量对 786-0 细胞 干预24h后，流式细胞仪检测细胞表面MHC-II的表达量，相应的平均荧光强度分别为： 对照组：MHC-II （0Gy）9.07%±1.43%；处理组：MHC-II （6Gy）11.46%±1.55%；CRT （12Gy）23.82%±2.61%；MHC-II （24Gy）31. 52%±2.63%。各实验组分别与对照组两 两相比，均有显著性差异（P 值均0.05）。随照射剂量的增加 MHC-II 表达逐步上升， I 摘 要 同样呈明显剂量依赖关系。 结论：1 放疗后24h，人肾透明细胞癌786-0细胞膜表面免疫源性相关分子CRT、 MHC-I、MHC-II 表达上调，说明放疗除了对肿瘤细胞的直接杀伤作用以外，还能够诱导 其免疫源性增强，这对提高机体免疫细胞识别肾肿瘤抗原的能力并诱导更强大的肿瘤杀 伤效应创造了条件。 2 照射剂量与 CRT、MHC-I、MHC-II 在肾透明细胞癌 786-0 细胞 膜表面的表达量有一定相关性，而较低剂量的放疗就能达成这一效应，说明小剂量放疗 已经能够足以诱发肾透明细胞癌786-0肿瘤细胞产生免疫源性改变，提示小剂量放疗可 以有效诱导抗肾肿瘤免疫应答，这样避免了大剂量放疗所带来的严重免疫抑制及对机体 正常器官组织的毒副损伤。本研究的结果提示：小剂量放疗能够有效诱导肾透明细胞癌 786-0细胞膜表面免疫源性相关膜分子 CRT、MHC-I、MHC-II表达增多，说明放疗具有诱 导并强化机体产生抗肾肿瘤免疫应答的能力，虽然其详细机制仍需继续探索，小剂量放 疗联合细胞免疫治疗产生的协同效应，有可能为实现更有效的抗肾肿瘤治疗的一条新途 径。 关键词 放射治疗 钙网蛋白（CRT） MHC-I/I