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结合理论、实操及仿真培养技能型人才摘要：本文围绕全国高职高专生物技能大赛“发酵工”这一比赛项目，总结了连续两年的参赛经验，从理论、实操及仿真三方面指导学生如何抓住和突破重难点，为技能型人才培养工作打下基础。 关键词：技能大赛；发酵工；仿真 中图分类号：G712 文献标识码：A 文章编号：1671-0568（2013）11-0098-03 全国高职高专生物技术职业技能大赛属于国家二类赛事，其顺利举办是贯彻教育部《关于全面提高高等职业教育教学质量的若干意见》（高教[2006]16号）文件精神的体现。大赛以“技能——应用能力”为主题，为学生展示专业技能搭建平台，提升生物技术类专业人才培养工作水平。[1] 竞赛分为理论知识竞赛和技能操作竞赛两部分，两部分成绩分别占总成绩的20%和80%，命题依据高级工及以上的知识要求和技能要求进行。考试由基础理论知识、实际操作和仿真软件操作组成，理论涵盖化学、生物类专业基础知识，实际操作内容为微生物培养及分离，仿真软件操作内容为“青霉素发酵”。 一、理论知识的学习 理论部分主要参考《发酵工理论试题库》，由大赛委员会提供，覆盖了无机及分析化学、有机化学、生物化学、微生物学等基础课程，题目和知识点较多，主要考查学生对知识点的掌握程度。指导学生时，要求他们理清知识点，往往一个知识点可以衍生出较多的题目。结合学生赛后体会，分“三步走”。首先，要动手做《发酵工理论试题库》，每做一题都弄清楚它的出处，不会做的题做上记号，回头查看教材，搞懂为止；其次，是识记题目。放弃死记硬背，要结合相应的教材灵活运用，找到对应的知识点。，先看书，再记忆，通过早期知识点的零散积累，到最后知识点的连贯。在记忆一个知识点或者是一个题目的时候，顺带记忆相关的知识点和相关的题目，如果遇到相近的题目可以采取比较记忆，相反的题目可以采取对比记忆；最后关头加强记忆，可借助电脑做题，抓住重难点，反复强化记忆。同时，要广泛涉猎有关的课外书籍，多钻研一些偏难的知识点或题目，以求在大赛时拉开理论考试的分差。 二、微生物培养及分离 1.微生物涂布和划线分离培养注意事项 （1）酒精擦手、擦拭工作台面及实验工具：在评分细则里面讲到了文明操作分，关键在于操作者是否有该动作，是否擦拭彻底，比如无菌试管、斜面菌种试管和盛装培养基及无菌水的蓝盖瓶，都需要仔细擦拭。 （2）宜整理思绪并稳定情绪。 （3）培养皿及器的清理及摆放：该操作点也是文明操作的一部分，在保证得分的同时，也保证了后续操作的顺利进行。要检查是否有仪器遗漏，以便及时向裁判和大赛志愿者申请补上，期间有助于及时进行试管编号：共六个培养皿和三根无菌试管。该步骤保证了后续操作的有序性，涂布和划线及试管的编号要明确，且要有对应的关系。 （4）倒培养基：要注意的是，必须在该操作之前用酒精棉球擦拭双手，做到无菌操作，将15～20mL冷却至50℃的无菌培养基倾注于无菌培养皿内，将培养皿稍加旋转振荡均匀后，置于水平位置，待凝固，共倒置6个培养皿。该操作一定要注意防止培养基倒出培养皿或滴落在操作台面上，同时操作一定要在酒精灯火焰附近进行。 （5）无菌水的转移：该步骤的关键在于吸取无菌水和调节液位时的准确熟练，并且无无菌水洒出的现象。用完的移液管必须过火之后倒插入废液缸中，不能出现用完的移液管直接放于操作台面上的操作。每次用过的洗耳球也要倒放于操作台面上。此操作完毕后，盖上无菌水蓝盖瓶瓶盖。要求每次移液时，试管先过火焰之后打开再过火，移取完毕也是先过火焰之后盖上棉塞再过火，最后放于试管架上。必须注意的是，移液时右手上至少夹着一个棉塞。 （6）挑菌稀释：要注意接种环火焰灭菌技巧及余菌的灼烧处理，正确使用移液管，保证无交叉无污染。 （7）台面的清洁：操作完之后熄灭酒精灯，整理台面，恢复到操作之前的样子，并举手交卷离开。 2.染色判断的注意事项 （1）仪器的清理及摆放：该操作点也是文明操作的一部分，检查是否有遗漏，按照自己平时训练的习惯摆放，稳定情绪。 （2）酒精擦手、擦拭工作台面并清洗载玻片：该实验操作虽然对无菌要求得不是很严格，但依据评分细则，要有动作体现。 （3）清洗载玻片：点燃酒精灯，挑取三块载玻片用酒精棉球擦拭清洗（注意防止破损载玻片），洗净后将其整齐地放在操作台面上，待其干燥之后用记号笔编号。 （4）选菌并做记号：从培养皿中挑选三个菌落形态不同的菌，然后在所选中的菌落对应的培养皿底部做上记号并编上1，2，3。 （5）制片：在其火焰附近向三块洗净的载玻片上分别滴取一小滴生理盐水，放置在台面上，分别取出所选菌种，对照编号，在相应的卷面表格上记录好菌落特征（表面湿度、大小、粗糙度、边缘是否整齐、菌落形态