细胞膜钙离子通路Orail的阻滞对实验性小鼠变应性鼻炎的作用.pdfVIP

复旦大学博士论文 细胞膜钙离子通路Orail的阻滞对实验性小鼠变应性鼻炎的 影响 中文摘要 目的：Orail是组成钙离子释放激活的钙离子通道(CRAC通道)至关重要的亚 单位，对存储调控性钙离子内流(SOCE)起着关键性作用。关于Orail的研究 目前已比较深入，但对于此通路在变应性鼻炎方面的作用目前尚未有研究涉及。 本实验意欲检测Orail在变应性鼻炎小鼠模型中的表达以及评估Orail通路的阻 滞对免疫球蛋白E(IgE)介导的过敏反应的影响。 材料和方法：采用BALB／c品系小鼠，通过重复腹腔内注射卵清蛋白致敏、反复 鼻腔内滴入卵清蛋白激惹建立变应性鼻炎小鼠模型，然后用免疫组化染色法、蛋 白印迹法(westem RT-PCR) blotting)和实时反转录聚合酶链反应法(real．time 检测Orail在对照组、实验组和2．氨基乙N-苯基硼酸(2-APB)干预组小鼠鼻 粘膜和鼻相关淋巴组织(NALT)中的表达，另外用酶联免疫吸附实验(ELISA) 法分析上述几组小鼠鼻腔灌洗液中的白细胞三烯C4(LTC4)、嗜酸性粒细胞阳 RT-PCR法检测几组小鼠鼻粘膜中的白细胞三烯C4合酶 的含量，并用real．time mRNA的含量和小鼠NALT中的胚 (LTC4S)信使核糖核酸(mRNA)、ECP mRNA的表达。 系Ce转录体、IL-4 结果：研究发现Orail在鼻粘膜上皮细胞、粘膜下腺上皮细胞和NALT的免疫系 统细胞中均有表达，在实验组表达尤为显著；2-APB鼻内滴入干预组小鼠相对于 实验组小鼠的喷嚏数、挠鼻次数以及鼻粘膜内浸润的嗜酸性粒细胞数都明显减 少，而且干预组Orail在小鼠鼻粘膜和NALT中的表达也明显少于实验组，同时 研究还发现，干预组小鼠鼻腔灌洗液中的LTC4、ECP、slgE和IL．4以及这些物 质相应的mRNA的含量相对于实验组亦有显著抑制。 结论：本实验证实Orail在小鼠鼻粘膜和NALT中确有表达，2-APB小鼠鼻内滴 入的干预措施可以有效地缓解小鼠变应性鼻炎的发作。 关键词：Orail；变应性鼻炎；小鼠；模型；鼻粘膜 中图分类号：R765．21 复旦大学博士论文 ABSTRACT TheeffectofinterventionofOrail on pathwayexperimental ● ’‘ ‘ ● ● ● ‘ murlne rhinitis allergic Ca2+ listhe subunitoftheCa+release．activated Objectives：Oraipore．forming and a roleinthe key store-operatedCa十entry(SOCE)． (CRAC)channelsplays functionofthis in isknownaboutthe rhinitis(AR)． However，little pathwayallergic of l evaluatedwhetherthe Inthis weexami