流动注射荧光法测定羟基自由基.PDFVIP

( ) 第 31 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　研究简报 第 6 期 　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　 2003 年 6 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 723～725 流动注射荧光法测定羟基自由基 刘立明　宋功武 　刘丽虹　方光荣 (湖北大学分析测试中心 ,武汉 430062) 2 + 3 + 4 + 摘 　要 　研究 Sn 催化 H O 产生的·OH 的反应 , ·OH 与 Ce 作用后氧化生成无荧光的 Ce 。通过测定 2 2 Ce3 + 的荧光强度的变化可间接测定所产生的羟自由基 ,并结合流动注射技术 ,确定了体系最佳实验条件。测 定抗氧化剂清除羟自由基的实验 ,证明该体系可作为在线筛选抗氧化剂的方法之一。 关键词 　荧光法 ,羟自由基 ,流动注射 1 　引　　言 羟自由基( ) ·OH 是一种氧化能力很强的自由基 ,它能够很容易地氧化各种有机物和无机物 ,氧化效 率高 ,反应速率快 ,是造成组织脂质过氧化、核酸断裂、蛋白质和多糖分解的活性氧 ,与机体的衰老、肿 瘤、辐射损伤和细胞吞噬有关。近年来 , 国内外文献报道的检测羟自由基的主要方法有电子自旋共振 法1 、高效液相色谱法2 、化学发光法3 、比色法4 、光度法5 ,6 等。分光光度法和荧光法简便实用 ,但采 2 + 用流动注射荧光法报道甚少。实验以 H O 为氧化剂 ,Sn 与 H O 作用产生·OH ,该反应类似 Fenton 反 2 2 2 2 应7 ,Ce3 + 与·OH 作用后氧化生成无荧光的 Ce4 + ,通过测定 Ce3 + 的荧光强度的变化间接测定所产生的 羟自由基。该法仪器简单 ,操作简便 ,测定快速 ,适于羟自由基的在线测定和监控。 2 　实验部分 2. 1 　仪器与试剂 ( ) ( ) RF540 荧光分光光度计 日本岛津公司 ;LZ1000 型流动注射仪 沈阳肇发自动分析研究所 。 H O 溶液 3. 0 ×10- 4 molL ; Sn2 + 溶液 1. 0 ×10- 4 molL ; Ce3 + 溶液 8. 03 ×10- 3 molL ; H SO 5. 0 ×10- 5 2 2 2 4 molL ;抗坏血酸 1. 0 ×10- 3