野生型XPD转染对胆管癌细胞生物学行为作用.pdfVIP

lIIII I I II IIIIr ill IIIII Y1 摘要 摘 要 因对人胆管癌细胞的生物学影响。 I、BGI 取质粒以KPN II和SPH 细胞作为空白对照组。用脂质体转染法瞬时转染四组细胞。荧光显微镜下观察 转染后绿色荧光蛋白报告基因表达情况。提取各组细胞总RNA，合成cDNA，用聚 合酶链反应(PCR)检测四组细胞中XPD、p53、cyclinDl、c-myc表达情况，并 用四甲基偶氮唑盐(MTT)和流式细胞仪检测细胞增殖及其细胞周期的变化。 细胞中XPD 组相比，XPD mRNA相对表 mRNA表达量明显增加(氏O．01)。四组细胞中p53 mRNA相对表达量与三对照组比较明显升高，差异具 pEGFP-N2．XPD细胞中p53 mRNA相对表达量为：0．339± 有统计学意义(尸O．01)。四组细胞qbcyelinDl 三对照组相比，cyclinDl mRNA相对表达量明显降低 0．050，pEGFP-N2．XPD细胞与三对照组相比，c．myc 为1 ％、29．52％、27．28％，结果具有统计学意义(PO．05)。3．MTT检测示 弱(P0．01)。 Ⅱ 摘要 结论：野生型xPD基因可以抑制胆管癌细胞的生长，XPD基因可抑制 cyclinDl、c-myc基因的表达，增2Hp53基因表达。 关键词：胆管癌，QBC939细胞，XPD， c-myc，cyclinDl，p53，细胞周期 111 Abstraet ABSTRACT XPD wastransfectedintohuman objective：newild—type gene cell line the cholangiocarcinomaQBC939byLipofectAMINE,toinvestigate effectsof Xeroderma D onhuman biological wild—type Pigmentosumgene cholangiocarcinoma． Methods：Therecombinant andthe were plasmidpEGFP-N2一XPDpEGFP-N2 extractedalkaline the wen KPN method，then I，BGI by lysis plasmiddigestedby IIandSPHIrestrictionendonuclease．Thewereclassifiedfour