长期培养的CK细胞hTERT基因表达水平的动态变化.pdfVIP

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长期培养的CK细胞hTERT基因表达水平的动态变化

·中文论著摘要· 长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平 的动态变化 实验目的 初步探讨长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平的变化,进一步评价CIK 细胞治疗的安全性。 实验方法 抽取3名健康人外周静脉血进行CIK细胞培养,每周台盼蓝染色计数细胞, 基因的表达水平,流式细胞仪分析培养第0、7、14、28、49及56天的CIK细胞 周期的改变并检测凋亡。MTT法测定培养第14、30天的CIK细胞对肺腺癌 LTPEP.a-2细胞系的细胞毒活性。 碴 田 ;日7K CIK细胞在体外培养第28天至第35天细胞增殖达高峰,分别由第0天的 与第0天相比分别扩增6.70、10.76和15.95倍,此后存活细胞逐渐减少,最终约 60天左右细胞全部死亡,与流式细胞仪检测细胞凋亡结果一致;CIK细胞hTERT 平较第0天增加约2.84+1.27倍,随后随培养时间延长表达水平下降,在培养l周 时降至培养初始水平,并在此后的培养过程中维持低水平表达:在CIK培养l周 时处于S期细胞比例最高,约41.27:t:4.57%,随培养时间延长G0/G1期细胞比例 细胞在第14天杀瘤活性约58.58+8.52%,在30天时杀瘤活性明显下降,约 32.47士7.51%。 结论 · 长期培养的CIK细胞随培养时间延长hTERT表达水平下降,未见细胞永生化 倾向。 关键词 hTERT基因SIK细胞;永生化;细胞凋亡 2 ·英文论著摘要· in The ofthehTERT the dyhamicchanges expression culturedCIKcells long·—term ective Obj To the ofthe ofhumantelomerasereverse investigatedyhamicchangesexpression the of the culturedCIK evaluate long-term cells,and safety transcfiptase(hTERT)in CIKcells. Methods bloodmononuclear 3 donorswereincubated Peripheral cells(PBMCs)fromhealthy ceBs to CIKcells.Cell WaSmeasured viable induce proliferation weeklybycounting

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