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长期培养的CK细胞hTERT基因表达水平的动态变化
·中文论著摘要·
长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平
的动态变化
实验目的
初步探讨长期培养的CIK细胞hTERT基因表达水平的变化,进一步评价CIK
细胞治疗的安全性。
实验方法
抽取3名健康人外周静脉血进行CIK细胞培养,每周台盼蓝染色计数细胞,
基因的表达水平,流式细胞仪分析培养第0、7、14、28、49及56天的CIK细胞
周期的改变并检测凋亡。MTT法测定培养第14、30天的CIK细胞对肺腺癌
LTPEP.a-2细胞系的细胞毒活性。
碴 田
;日7K
CIK细胞在体外培养第28天至第35天细胞增殖达高峰,分别由第0天的
与第0天相比分别扩增6.70、10.76和15.95倍,此后存活细胞逐渐减少,最终约
60天左右细胞全部死亡,与流式细胞仪检测细胞凋亡结果一致;CIK细胞hTERT
平较第0天增加约2.84+1.27倍,随后随培养时间延长表达水平下降,在培养l周
时降至培养初始水平,并在此后的培养过程中维持低水平表达:在CIK培养l周
时处于S期细胞比例最高,约41.27:t:4.57%,随培养时间延长G0/G1期细胞比例
细胞在第14天杀瘤活性约58.58+8.52%,在30天时杀瘤活性明显下降,约
32.47士7.51%。
结论
· 长期培养的CIK细胞随培养时间延长hTERT表达水平下降,未见细胞永生化
倾向。
关键词
hTERT基因SIK细胞;永生化;细胞凋亡
2
·英文论著摘要·
in
The ofthehTERT the
dyhamicchanges expression
culturedCIKcells
long·—term
ective
Obj
To the ofthe ofhumantelomerasereverse
investigatedyhamicchangesexpression
the of
the culturedCIK evaluate
long-term cells,and safety
transcfiptase(hTERT)in
CIKcells.
Methods
bloodmononuclear 3 donorswereincubated
Peripheral cells(PBMCs)fromhealthy
ceBs
to CIKcells.Cell WaSmeasured viable
induce proliferation weeklybycounting
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