白芍总苷对大鼠缺血再灌注损伤心脏的作用及及内质网应激的关系.pdfVIP

白芍总苷对大鼠缺血再灌注损伤心脏的作用及 与内质网应激的关系 摘要 目的: 研究白芍总苷（total glucosides of paeony, TGP ）对在体大鼠缺血再灌注损 伤心脏血流动力学的影响，及对缺血区心肌细胞坏死和凋亡的影响，探讨其抗心 肌缺血再灌注损伤的作用与内质网分子伴侣蛋白 GRP78(glucose-regulated protein78, GRP78)及凋亡起始因子Caspase-12 信号转导通路的关系。 方法: 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支(left anterior descending, LAD)及再通的方 法制备心肌缺血再灌注损伤模型。将48 只大鼠随机分为6 组：假手术组（sham 组）、模型组（I/R ）、TGP （50mg/kg ）组、TGP(100mg/kg)组、TGP(200mg/kg) 组、葛根素组 （puerarin, PUE 100mg/kg）。白芍总苷组在术前一周灌胃，早晚一 次。假手术组和模型组分别给予等量溶媒。葛根素于再灌注前5 分钟经颈总静脉 注射。大鼠右颈总动脉插管监测缺血前、缺血后30 分钟、再灌注90 分钟左心室 血流动力学参数：±dp/dtmax 、LVSP 、LVEDP ；用氯化三苯基四氮唑(Triphenylte trazolium chloride,TTC)染色法测定梗死灶面积；用脱氧核糖核酸末端转移酶介导 的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡；用免疫印迹(western blot)法 分别检测再灌注60 分钟、90 分钟心肌组织GRP78 及Caspase-12 的表达。 结果: 1.对血流动力学的影响：对±dp/dtmax 、LVSP 、LVEDP 监测显示白芍总苷 有改善心肌缺血再灌后大鼠心脏舒缩功能的作用，高、中剂量组效果比较明显。 2.对缺血再灌注大鼠心肌梗死面积的影响：假手术组（sham 组）、模型组（I/R ）、 TGP （50mg/kg ）组、TGP(100mg/kg)组、TGP(200mg/kg)组、葛根素组（100mg/kg） 梗死面积分别为0、(47.50±1.75)%、(27.15±1.83)%、(18.71±2.13)% 、(10.25±1.01)%、 (9.25±2.33)% ，与缺血再灌注模型组相比各剂量白芍总苷组具有明显减小心肌梗 死面积的作用(P 0.05) 。3. 对缺血再灌注大鼠心肌组织HE 染色的影响：白芍总 苷可以减轻炎症反应，减少炎细胞的浸润，缓解心肌细胞水肿，改善心肌纤维皱 缩现象。4. 对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡的影响：假手术组（sham 组）、模 - 2 - 型组（I/R ）、TGP （50mg/kg ）组、TGP(100mg/kg)组、TGP(200mg/kg)组、葛根 素（100mg/kg）组的心肌细胞凋亡率分别为(1.5±0.5)%、(22.3±3.7)%、(19.8±2.9)%、 (15.7±2.1)%、(10.2±1.3)%、(9.8±1.5)% 。中、高剂量白芍总苷组与缺血再灌注模 型组相比可明显降低损伤心肌细胞的凋亡率(P0.01) ，低剂量白芍总苷组对比模 型组无显著的差异。5.对缺血再灌注大鼠心肌组织 GRP78 表达的影响：白芍总 苷与模型组相比可促进GRP78 在再灌注60 分钟、90 分钟时的表达(P0.05) ，且 药物剂量越大促进作用越明显。6.对缺血再灌注大鼠心肌组织Caspase-12 表达的 影响：与模型组相比，白芍总苷可以下调心肌组织内质网凋亡因子 Caspase-12 在再灌注 60 分钟、90 分钟时的表达(P0.05) ，并且药物剂量越大，作用效果越 明显。 结论: 1.白芍总苷可以改善在体缺血再灌注大鼠心脏的舒缩功能，缩小梗死面积， 减轻心肌超微结构的损伤。 2. 白芍总苷可减少在体大鼠缺血再灌注所引起的心肌细胞凋亡和坏死。 3. 白芍总苷能抑制Caspase-12 的表达，同时上调GRP78 的表达。 4. 白芍总苷的抗凋亡作用可能与内质网应激信号通路有关。 关键词：白芍总苷；细胞凋亡；内质网应激；GRP78 ；Casp