分子遗传学4-学生版的.pptVIP

第四章 转录（transcription）;*; 一、RNA合成的基本特点; 二、RNA合成和DNA复制的区别; 三、有义链和无义链;*;● 某一基因只以一条单链DNA 为模板进行转录（不对称转录） ;● 原核生物中的转录单位多为多顺反子，有操纵子结构； ;研究转录涉及到两个方面： 其一是RNA合成的酶学反应； 其二是RNA合成的起始、延伸、终止和释放各阶段；; 大肠杆菌的RNA聚合酶是目前了解最详细的RNA聚合酶 在一个大肠杆菌细胞中，大约有7000个RNA聚合酶分子，其中有2000－5000个酶分子在参与RNA的合成 RNA聚合酶合成RNA的速度：37℃ 约40个核苷酸/秒 RNA pol 和DNA pol有两点不同： （1）RNA pol 没有任何校对功能； （2）在不需要引物的前提下能起始合成新的RNA链。 ;大肠杆菌RNA聚合酶;*; ? 因子（蛋白）包含一个螺旋-转角-螺旋结构，可以嵌入 DNA 大沟，并通过氢键与 DNA 紧密结合。;*; 枯草杆菌至少有 10 种 ? 因子： ?A，B，C，D，H，L：识别营养生长期表达的基因的启动子 ?E，F，G，K：识别孢子形成期表达的基因的启动子;*;*;*;*;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; RNA pol 执行的功能; 二、转录的起始与延伸;*; CAP-cAMP binding site ;Site II + CAP-cAMP 复合体 促使Sextama Box 附近GC岛区的双螺旋结构稳定性降低， Pribnow Box 的解链温度降低，利于转录启动 ;(1)结构典型,都含识别（R，即-35区),结合（B，即-10 区)和起始（I，+1）位点; (2)序列保守;如-35和-10序列结构； (3)位置和距离都比较恒定； (4)直接和多聚酶相结合； (5)位于基因的上游； (6)决定转录的启动和方向； (7)常和邻近基因共同组成操纵子（operon），这也是原 核生物的特性。; 典型启动子的结构;*; -10区（Pribnow 框 ）;-10序列的碱基组成对转录的效率影响很大，发生此区域的某些突变会导致如下结果：;转录开始时模板上的第一个碱基 为转录起始位点； 在原核生物中90%以上为A或G； 位置固定，常见序列是CAT。 ;*;*;*;*;*;（三）RNA的合成延伸;转录过程 ; 三、转录的终止; 自发终止 在 RNA 链中需要两种序列元件： 位于 RNA 3? 末端的富含 U 的序列，即U串； 靠近 RNA 3? 末端的自互补序列（即回文序列），可形成茎-环结构。; 强终止子的结构; N N N N N G ·C C ·G C ·G G ·C C ·G G ·C C ·U …NNNNC ·U UUUU…-OH 3’ mRNA 强终止子结构的模式图 ;强终止子的结构特点：;依赖于 ? 因子的终止 大肠杆菌中的 ? 因子为碱性蛋白，分子量为 46 kDa，有解旋酶功能。 ? 因子识别 RNA 上的 rut 位点，与之结合，然后向转录酶移动。当转录酶到达终止序列时，则停止合成 RNA，于是 ? 因子赶上转录酶，使 RNA-DNA 杂交链解开，从而 RNA 和转录酶脱离，转