TNNI3K基因表达及心肌肥厚形态学变化的相关性分析研究.pdfVIP

怂{，：：7：L 目 录 中文摘要………………………………………………．． 英文摘要………………………………………………．． 研究论文TNNl3K基因表达与心肌肥厚形态学变化的相关性研究 前言……………………………………………………………………9月lJ舌 ………．………．．…………………．………．……．．．…．………… 材料与方法……………………………………………………………10 结果……………………………………………………………………15 附图……………………………………………………………………17 附表……………………………………………………………………28 讨论……………………………………………………………………30 参考文献………………………………………………………………31 综述凋亡与心肌肥厚及心力衰竭…………………………………………33 致谢…………………………………………………………………………47 个人简历……………………………………………………………………48 中文摘要 TNNl3K基因表达与心肌肥厚形态学变化的相关性研究 摘 要 心肌肥厚是心肌细胞对多种损害心脏泵功能的病理性刺激的一种代 偿性反应，藉此代偿性增加心脏的泵血功能。这些刺激信号可分为三类： 力学信号、神经激素信号和细胞因子信号。如这些病理性刺激不能被及时 去除，最终可致使心肌组织发生严重的病理改变，心功能受损，以至于心 功能衰竭。因此，心肌肥厚的机制研究一直为心血管研究的热点。 kinase)是在心脏特异性表达的心肌激酶基 TNNl3K(cTnI．interacting 因，它可能与心肌肌钙蛋白I和心肌肌动蛋白等肌小节收缩调节蛋白的功 能有关，并可能通过一条未知的信号转导通路参与了对肌小节收缩蛋白的 调控，进而调控心肌收缩能力。因此TNNl3K可能在超负荷心肌肥厚的 发生过程中发挥重要作用。 第一部分：TNNl3K在大鼠压力超负荷心肌肥厚模型的表达 目的：观察在心肌肥厚的发生和发展过程中心脏的结构变化，及与 TNNl3K的表达的相关性。 组(Con)： 模型的制备参考AnversaP的方法。假手术对照组只分离左肾动脉上方的 腹主动脉，并不结扎。其他步骤与模型组相同。 1 HE染色观察心肌的形态结构 将实验鼠麻醉后处死，取其心脏并将左心室分成两部分，一部分放入 4％多聚甲醛固定液内固定。常规石蜡切片HE染色，于光学显微镜下观 察形态变化，日本产Nikon光学显微镜下拍照。 2电镜观察左心室的超微结构变化 将另一部分左心室标本放入3％多聚甲醛和1％戊二醛混合固定液中固 定。用于电镜观察左心室的超微结构变化。 3免疫组织化学染色法观测TNNl3K基因表达变化 中文摘要 将HE染色后剩余标本常规石蜡切片，做免疫组织化学染色，于光学 显微镜下观察，日本产Nikon光学显微镜下拍照，并用图像处理软件 (ImageProPlus6．O)进行图像分析。 结果： 腹主动脉缩窄术后2至6周，血流动力学和心脏重量指数均发生相应 动物发生向心性肥厚。 l左心室壁的组织学变化 各对照组心肌纤维排列整齐，细胞的平均直径为9．7～9．9pm，胞核的 平均直径为2．30～2．39pm。2周模型组的心肌细胞弥漫性肥大，其胞体平 平均直径为3．46+0．169m；心肌纤维走行紊乱，肌纤维间隙增宽，并可见 间质纤维化。6周模型组，心肌细胞进一步肥大，其胞体平均直径为 l6．08+2．699m，核的平均直径为3．65+0．159m，肌纤维走行紊乱、断裂， 间质纤维化严重。 ． 2大鼠左心室壁的超微结构变化 各对照组大鼠心肌原纤维排列整齐，明带、暗带、Z线及闰盘清晰， 肌节长约1．639m。线粒体分布在心肌原纤维之间，多为椭圆形，呈串珠 状排列，线粒体嵴清晰呈板层状排列，较稀疏。腹主动脉缩窄术后2周时： 心肌原纤维整齐，闰盘和肌节清晰，肌节长1．83+0．089m；线粒体逐渐增 多，并出现集结现象，集结处线粒体多呈圆形，线粒体嵴排列