疟原虫检查sop.docVIP

目的： 检测有无疟原虫感染。 取材： 静脉穿刺抽取外周血，EDTA抗凝。 操作： 3.1.薄血片法 3.1.1.取外周血1滴于载玻片上，以常法推制成薄涂片。 3.1..2血膜完全干燥后即可染色。用瑞氏-姬姆萨复合染色或瑞氏染色法均可。干后镜检。 3.2厚血片法 3.2.1在洁净玻片上，滴患者血液2滴。 3.2.2用推玻片将血液由内向外转涂成直径约1cm厚薄的血膜，在室温中自然干燥。 3.2.3在干燥的血膜上滴加蒸馏水数滴，完全覆盖血膜，溶血约5min。脱去血红蛋白的血膜呈浅灰色，倾去溶血液。 3.2.4不必待干，进行染色，染色法同薄片。 3.2.5干后镜检（结果见附表和附图） 4. 注意事项： 4.1采血时间 间日疟及三日疟患者应在发作后数小时至10h左右采血，此时，早期滋养体已发育成易于鉴别形态的晚期滋养体；恶性疟患者，应在发作后20h左右采血。 4.2厚血片的溶血要及时，溶血不完全，会影响检验质量。厚血片的存放期限在夏季不超过48h，冬季不超过72h。 4.3染色后，水洗时不要先倒去染液，应让流水把染液带走，使沉渣漂浮冲走。 4.4油镜检查，薄片须至少检查100个视野，厚血片至少检查20个视野，才能报告“未检出疟原虫”。 4.5疟原虫必须分类报告。找到环状体后，须再仔细寻找更为成熟的阶段，以便分类；如确实未找到更为成熟的疟疾原虫，可报告为“检出环状体疟原虫”。 4.6有可能出现2种或3种疟原虫混合感染时，以间日疟与恶性疟原虫混合感染最为常见，须注意鉴别。 4.7注意易与疟原虫混淆的其他杂物区别，特别是厚血片检查时，应在薄片上仔细寻找证实才能报告。 除上述3种疟原虫外，在我国云南曾发现过少数卵形疟原虫引起的病例。卵形疟原虫的形态基本上与三日疟原虫相似，但虫体稍大，受感染的红细胞略胀大，且红细胞边缘是不整齐锯齿状，滋养体后期及裂殖体前期的原虫呈圆形或卵圆形。 附表：薄血片上3种疟原虫形态特点： 形态特点 间日疟原虫 三日疟原虫 恶性疟原虫 （ 环 状 体） 早 期 滋 养 体 虫体大小 较大， 约为红细胞的1/3 较大， 约为红细胞的1/3 较小， 约为红细胞的1/6 细胞浆 浅蓝色， 呈较薄之环状 浅蓝色， 呈较厚之环状 浅蓝色，环状较细，常位于细胞边缘，有时1个细胞内有2个环状体 染色质 可很大，甚至充满整个红细胞 与间日疟原虫同 红色小点，1个环状体具有1-2个-或更多 晚 期 滋 养 体 虫体大小 可很大，甚至充满整个红细胞 较小 末梢血液中查不到 细胞浆 呈阿米巴状，变化很多 呈坚实带状，变化不多 疟色素 棕黄色，呈微小短杆状，四散分布 黄绿色，呈较粗颗粒状，四散分布 斑点 薛氏小点，鲜红细小，均匀分布 齐氏小点，红色 裂 殖 体 虫体大小 很大 较小 在末梢血液中查不到 细胞浆 松散，比较不规则 坚实较圆 裂殖子数目 12-24个，平均16个 6-12个 裂殖子形态 排列不规则 排列不规则或呈花朵状 配 子 母 体 虫体大小 圆形， 约为红细胞1/2以上 圆形， 与红细胞等大或较小 半月形，两端钝圆（雄），两端较尖（雌） 细胞浆 深蓝色 深蓝色 蓝色 染色质 结实，深红色，位于一边 结实，深红色，位于一边 结实，深红色，位于中央 疟色素 沿边分布 沿边分布 黑褐色，集于中央 红细胞 胀大，色较淡 正常或缩小 正常，偶然缩小，色深 附图：镜下所见疟原虫形态： 间日疟原虫 三日疟原虫 恶性疟原虫 环 状 体 滋 养 体 —— —— 裂 殖 体 —— 配 子 体 南方医科大学第三附属医院检验科SOP文件 疟原虫检查 文件编号：JYK-LJ-010 打印册数：2 编 写 者：马珊玲 审 核 者：刘京平 审核日期：2012-03-01 页 码：1 共3页