水稻苗期质膜H-%27%2b--ATPase基因在不同养分供应状况及环境胁迫下的表达特征的分析研究.pdfVIP

摘要 水稻苗期质膜H+．ATPase基因在不同养分供应状况与环境胁 迫下的表达特征研究 摘要 植物细胞膜上的质子泵(一一pump)或i-i+-ATPase(EC3．6．1．35)是一类通过 水解ATP产生能量，将细胞质中的旷逆浓度泵出细胞的运输蛋白。其主要功能 是在细胞膜两侧产生H+浓度梯度和膜电位，以质子驱动力的形式推动各种离子 和小分子代谢产物进行跨膜运输。细胞膜质子泵是由一个多基因家族编码的， 可将其分为五个亚家族。研究表明，细胞膜质子泵基因的表达具有一定的组织 特异性，反映了不同组织的生理需求。由于质膜旷．ATPase是由多基因编码的蛋 白，因此其转录水平上的变化在一定程度上决定了其活性的变化。 水稻是我国重要的粮食作物，而且也是一种典型的模式作物。因此本论文通 过RT-PCR方法分析了全铵，全硝，缺氮(包括恢复供氮)，缺磷(包括恢复供磷) 以及pH、模拟干旱或盐胁迫下质膜质子泵基因的表达特征。结果发现： (1)在水稻根和叶中大量表达的质膜旷．ATPase基因均属于亚家族I的 OsPMAl，2，3和属于亚家族Ⅱ的OsPMA7，其余的未见表达。在缺磷后，根系中 的OsPMAl．2．3。7的表达都降低，但是恢复供磷后这些基因的表达又开始逐 渐上调，但是叶片中这些基因的表达则没有发生明显的变化。缺氮时根系中仅 OsPMA7的表达有所降低，但是氮素形态(供铵或供硝)并没有造成其基因表达 上的差异，并且与对照之间也无明显的差异。叶片中的OsPMA基因的表达均不 受缺氮或供氮形态(供铵或供硝)的影响． 表达随着胁迫时间的延长出现下调的趋势，并且当胁迫时间达到96小时后， OsPMA7的表达量也开始降低。而叶片中的质子泵表达没有受到根际pH的影响。 盐胁迫下，根系中OsPMAl．2，3的表达未见明显变化，但是OsPMA7的表达 受到抑制。在叶片中，上述质子泵基因的表达都有所上调。模拟干旱胁迫(PEG 处理)下，无论根系还是叶片中的质子泵基因的表达均未受到影响． (3)对14-3·3蛋白家族在转录水平的检测发现，它们的表达强度在总体上 未受到缺磷、缺氮或是不同氮形态供应的影响， Osl4．3．3 10基因在缺磷时表 达上调． 本研究通过对上述基因表达模式的分析，为逆境胁迫下水稻细胞膜质子泵的 在转录水平上的调控提供了初步的信息。 关键词细胞膜H+-ATPase；14．3．3蛋白；半定量RT-PCR；水稻 II ABSTRACT OF MEMBRANEH+-ATPase EXPRESSIONPATTERNSPLASMA GENESINRICEUNDERDIFFEIUtENTNUTIUTIONSUPPLY STRESS STATUSANDENVIRONM[ENTAL ABSTRACT PlasmamembraneH+-ATPaseisauniversal usesATPas electrogenic矿pump，which sourceto H+acrossmembranesintothe functionof energy pump plasma apoplast．Thekey this isto an旷electrochemical the enzymegenerate driving gradient，therebyproviding forcefortheactiveinfluxan