西洋参悬浮细胞大量培养技术的分析研究.pdfVIP

摘 要 西洋参(Panax 其件较温和，具有滋补、强心、镇定、抗癌和抗衰老等多种医疗功效。现代化学及药理 论野生还是栽培的西洋参由于其自身的生理特性，一般需四至六年才能收获入药，产量 远远不能满足市场的需要。因此，通过细胞培养方法大量生产人参皂甙，以满足人们的 需要，具有十分重要的意义和广阔的市场前景。 以四年生西洋参根为实验材料，在MS基本培养基中添加2，4一D、KT等植物激素， 通过对参根外植体的诱导和培养，筛选出来质地疏松、生长快速的愈伤组织无性系。然 配比与组合的筛选，建立了西洋参愈伤组织无性系培养的生长培养基配方(MS+I．0mg／L KT+0．5 NAA+O．5 2．4-D+0．1mg／Lmg／L mg／LIBA+700mg／LLH+3％蔗糖)。将该愈伤组织 接种到液体培养基中进行振荡培养，经多次继代，筛选获得了分散程度好的西洋参悬浮 细胞系，并对其进行了动力学分析，表明该细胞系具有高产、性能稳定的特点，可用于 大规模的工业化生产人参皂甙。 通过在西洋参细胞悬浮培养过程中添加、改变各种理化因子，研究其理化因子与西 洋参悬浮细胞生长量和皂甙产量的关系。发现将MS培养基中的肌醇、烟酸、维生素B1、 维生素B6、甘氨酸的浓度增加一倍，可以使西洋参细胞培养物的生长量提高100％。西 乳糖，可使西洋参悬浮细胞培养物中皂甙产量提高2倍以上，达到677．25mg／L。并且， D一半乳糖也具有促进细胞生长的作用。 建立并优化了西洋参悬浮细胞培养工艺体系：培养温度(24±1)℃，培养液pH值 6．O，生长周期是25—30天。取处于对数生长期的西洋参悬浮细胞接种到悬浮细胞培养 液中，当细胞仍处于生长延迟时(接种后4天左右)，无菌条件下收集悬浮细胞，重新 接种于新鲜发酵培养液中继代培养，20天后补料，5天后收获。采用该工艺西洋参悬浮 细胞生长量可提高2．6倍以上。 关键词：西洋参细胞悬浮培养皂甙 Abstract has curativeeffcectsuch Panax isa rareherbwhichnumerous perennial quinquefoli骐m ofmodem asnourishing，cardiotonic chemicaland revealedthatthe activeconstituentsin pharmacologicalapproaches major be SOfar．Bothwild Panax are cannot artificiallysynthesized quinquefofiumsaponins，which materialafter four and Panax canbe usedasmedicinal growing planted quinquefoliumonly their istoolowtomeetthemarket tosix of properties．Itsproduction years，becausephysical of withcellcultureisof and demand．Therefore，masssaponins greats