姜黄素对SGC7901胃癌细胞株P300影响相关研究.pdfVIP

TBS Tris-buffered saline Tris 缓冲盐溶液 TBSE Tris-EDTA buffered saline Tris-EDTA 缓冲盐溶液 TEMED N,N, N´,N´-tetramethylethy N,N,N´,N´-四甲基乙二 －lenediamine 胺 Tris Tris (hydroxymethyl) aminomethane 三 (羟甲基)氨基甲烷 CBP CREB-binding protein CREB 结合蛋白 CREB cAMP response element cAMP 反应单元结合蛋白 binding protein PCAF P300/CBP associated facor P300/CBP 相关因子 4 姜黄素对SGC7901 胃癌细胞株P300 影响的相关研究 研究生：胡光胜 导 师：石 巍 中 文 摘 要 目的: 通过研究姜黄素对 SGC-7901 胃癌细胞株的P300、c-myc、P53 基因、乙酰化组蛋白 H3 和 H4 表达及对细胞增殖的影响，探讨姜黄素抗胃癌的分子机制,从而为姜黄素临床抗癌 提供理论依据。 方法:用 0、5、10、20、40 μmol/L 姜黄素作用于人胃癌细胞株 SGC-7901，分别共同培养 24、48 和 72 小时后，MTT 法检测细胞增殖，RT- PCR 法检测 p300、p53、c-myc 基因的 mRNA 的表达，蛋白免疫印迹法检测P300 蛋白、乙酰化组蛋白 H3、H4 的蛋白表达，免疫组化法 检测 P53、c-myc 蛋白表达。 结果: MTT 比色法结果显示：5、10、20、40 μmol/L 姜黄素能抑制 SGC-7901 胃癌细胞株 的增殖，与对照组比较均有统计学意义（P0.05）；各药物处理组之间的两两比较显示也有 统计学意义（P0.05），呈时间及剂量依赖性。RT－PCR 检测到 P300、c-myc 基因的 mRNA 表达量随姜黄素浓度增加而表达下降（P0.05），有一定的时效和量效关系，且P300 与 c-myc 基因之间存在着正相关（r=0.83），而 p53 基因的 mRNA 不受影响（P0.05）。Western blot 检测到姜黄素作用后 P300 蛋白和组蛋白 H3、H4 的蛋白表达量随浓度和时间的增加而表达 下降（P0.05），且每一药物处理组与对照组比较都具有统计学意义（P0.05）。药物处理 组之间比较也有统计学意义（P0.05）。免疫组化分析发现胃癌细胞中C－myc 蛋白表达量 随姜黄素的浓度的升高而下降（P0.05）,P53 蛋白表达则不受姜黄素的浓度的变化而变化 （P0.05）。 结论: 姜黄素抑制 SGC－7901 胃癌细胞株P300 的表达，进而抑制组蛋白 H3 和 H4 的乙酰 化，导致原癌基因 c-myc 的失活, 同时不影响抑癌基因P53 的表达,此途径可能是姜黄素抑 制胃癌的分子机制之一。 关键词： 姜黄素；胃癌；P300；组蛋白乙酰化；c-myc；P53 5 The effect of curcumin on the expression of P300 in the SGC-7901 cellline Abstract Objective: To investigate the effect of curcumin on expressions of p300, c-myc,