水肿病、水肿病康复仔猪源乳酸菌的分离鉴定及其抑菌机理的分析研究.pdfVIP

摘要 水肿病、水肿病康复仔猪源乳酸菌的分离鉴定及其抑菌机 理的研究 摘要 为了开发适用于猪的益生素，进一步明晰乳酸茵对仔猪特定肠道致病茵的作用机 制，本研究从水肿病、水肿病康复仔猪小肠黏膜上分离鉴定出ll株乳酸菌，并对其 生长曲线、产酸、抑茵、胃肠道因素耐受等特性进行了研究，最后筛选出1株生长速 度快，其它性能也较好的乳酸菌．整个实验分为四部分： 第一部分：试验选取泰州市饲养户同窝水肿病发病仔猪(6周龄)进行饲养，于 水肿病发病仔猪病死后屠宰2头病死猪，并同时屠宰2头同弩水肿病康复仔猪．从 水肿病病死猪肠系膜淋巴结分离并鉴定得到一株致断奶仔猪水肿病大肠杆菌0138； 从水肿病、水肿病康复仔猪十二指肠、空肠肠黏膜分离到11株乳酸菌，均为革兰氏 阳性．1l株茵中有4株菌生长速度、产酸明显快于其它菌株(P0．05)，编号为Ll、 L2．L3、L4．将这4株乳酸菌分别进行菌种鉴定，得出Ll为小鼠乳杆菌；L2为耐酸 乳杆菌；L3为类似肠乳杆菌；L4基本与鼠李糖乳杆菌相同． 第二部分：研究了模拟胃肠环境因素即低pH值、胆盐、胃蛋白酶对乳杆菌Ll：’ L2，L3、U存活能力的影响，以及这4株乳酸茵的耐热特性．结果表明，L2、L3菌 h，而L1和L4两菌株 株对低pH值的耐受性较好，在pH值为2．0时，能够存活3 对低pH值的耐受性较差，在pH值为2．0时，仅能够存活O．5h；随着pH值的升高， Ll、L2、L3和L44菌株的存活率亦提高．以不舍胆盐处理组为对照，胆盐浓度为0．08％ 时， 4菌 和L44菌株的存活无影响，65C以上能显著影响Ll、L2、L3和L44菌株存活数， 80℃处理后L4已检测不到活茵，但Ll、L3在80(2处理后仍有104的存活数． 第三部分：用体外厌氧发酵技术对实验一中从水肿病、水肿病康复仔猪十二指肠、 空肠肠黏膜分离到的4株乳酸菌的产酸能力进行比较，并对其抑茵特性及其产生的抑 茵物质的部分理化特性进行研究．结果表明：L3菌株产乳酸的速度最快，终末发酵 液中乳酸含量最高，为60．48mmol·L．1，pH值下降速度最快，终末pH值达到最低， 为3．70．在抑菌实验中，L3对致断奶仔猪水肿病大肠杆茵0138，肠致病性猪大肠杆 水肿病、水肿病康复仔猪源乳酸菌的分离鉴定及其抑菌机理的研究 株菌抑菌效果显著；排除酸后的结果表明，抑茵作用仍然保持90％pX上，说明L3菌 株的抑茵作用主要来自于产生的乳酸；抑菌物质具有热稳定性，经热处理后仍保有 95％pX上的抑菌效果；抑菌物质对蛋白酶不敏感，蛋白酶处理后仍保持90％以上的抑 茵效果． 第四部分：研究了一株分离自断奶仔猪小肠黏膜的肠乳杆茵L3体外发酵特性， 及其代谢产物对病原性大肠杆菌K88，0138存活的影响．体外发酵结果表明：12小时， 04．08 mmol／L．L3菌株代谢产物对 L3茵液pH值迅速降至3．90，并产生大量乳酸，为1 很强的抑制作用；L3菌株发酵液与含相同浓度乳酸的自制培养液比较结果表明：乳 MRS培养液具有一定的耐受能力． 关键词： 仔猪：大肠杆菌；乳酸茵；乳酸浓度；抑茵；耐受；生长抑制 Ⅱ ANDIDENTIFICATIONOFLACTICACID ISoLATIoN THEPIGLETINTESTINE BACTERIAFROM PRELIMINARYSTUDYONTHEIR AND ACTr～1TY ABSTRACT