1246112梁春平薄层色谱.docVIP

薄层色谱（TLC） TLC是一种简单，快捷，廉价的，让化学家能快速知道一个混合物里有什么成分的过程， TLC还用于支持证实一个混合物里的某个化合物，将化合物的的Rf与另一种已知化合物的Rf（优选都在相同的TLC板上运行）进行比较即可。 TLC板是玻璃，金属，或塑料在其上涂有一层薄薄的固体吸附剂（通常为二氧化硅或氧化铝）的片材。待分析少量的混合物在该板的底部附近点样，然后将TLC板放置含展开溶剂的展开缸中，使得该板的最底部浸在溶剂中。这种液体，或洗脱剂，是流动相，并且它通过毛细管作用在TLC板上缓慢上升。 当溶剂上移接触到样品点时，混合物中各组分分子吸附在固体和溶解在液体中建立一种平衡，原则上，这些组分有不同的溶解度，并且一些组件其吸附到吸附剂的强度比其他组件在板上会展开得更远，当溶剂到达板的顶部时，把板从展开缸中移出，干燥，然后将该混合物分离的组分可视化。如果化合物是有色的，可视化是直接的。通常这些化合物不显色，因此UV灯被用于薄层板的可视化（该板本身包含荧光染料除了有机化合物是在平板上）。 如何运行TLC板 第1步：准备在展开缸 展开缸为薄层专门设计的腔室，有盖的罐，或在顶部表面皿的烧杯（后者在CU用于本科实验室）。倒入缸内的溶剂深度小于0.5厘米，为了有助于薄层室与溶剂蒸气的饱和，可以在烧杯内部放一小部分滤纸，用表面皿将烧杯盖起来，轻轻地旋转它，然后在你准备薄层的时候让它保持着。 第2步：准备薄层板 在有机化学教学实验室中购买5厘米×20厘米TLC板，每大张板水平切割成5厘米高的各种宽度的板材，你想在板上跑越多的样品，那么板就需要越宽。所示的照片中的左侧是一个TLC板盒子，未切型的大TLC片，和一个已被切成合适的尺寸的小TLC板。仔细地握住板，这样你就不会干扰吸附剂的涂层或把它们弄脏。 测量从板的底部0.5厘米开始。用铅笔在整块板底部0.5厘米的地方划线，这是原点：在板的这条线上点样，注意不要用铅笔使劲按压以免干扰吸附剂，在线的下方，轻轻写下你在板上点样的样品名称，或以时间点为标记号标记样品，样品之间要留足够的空间，建议5厘米宽的板上点4个样品即可。 第3步：点板 假如样品还没有在溶液中，将它溶解在1毫升的挥发性溶剂如己烷，乙酸乙酯，或二氯甲烷。作为一个经验法则，以1％的浓度通常可以很好地用于TLC分析，如果样品过浓，将运行出模糊一片或者条纹斑点（参见下面的故障排除部分）;如果没有足够浓度，你会在板上什么也看不到。有时候，你需要用反复试验来获得大小适中，易于读取的斑点。 取一根微毛细管。在有机教学实验室，我们使用10μL毛细管 - 在研究实验室里它们比小的更容易处理使用。将毛细管浸到溶液中，然后轻轻地触摸它的尾部点到TLC板上的正确位置。不要让点变得太大 - 如果必要的话，你可以断续地点板，并吹干斑点。如果你重复这些步骤，板上湿的地区将会留小。 这个例子中同一溶液点三个不同的量并准备展开，如果你不确定要点多少样品，可以多点几个，看看哪个结果最好。 第4步：展开 将制备型TLC板放在展开烧杯中，盖上表面皿，并使其放在台面上保持原状。溶剂将通过毛细管作用在薄层板上升，确保溶剂不覆盖斑。 让该板展开直至溶剂低于板的顶部约半厘米，从烧杯中取出板，并立即用铅笔标记溶剂前沿，使该板干燥。 第5步：斑点可视化 如果有任何颜色的斑点，轻轻用铅笔圈出。大多数样品没有显色，需要用UV灯可视化。持UV灯在板上圈出你看到的任何斑点。当心！紫外线会损害到双方你的眼睛和你的皮肤！确保您戴着护目镜，不要直视灯泡并戴手套保护你的皮肤。 如果在TLC板运行样品时，浓度太大，斑点将挑染和/或跑到一起。如果发生这种情况，你将不得不开始一个较稀的样品在TLC板上点样和跑板。 下面是过载板和适合的斑点板相比。左侧板有一个大的黄色拖尾涂片，这种涂片含有相同的两个化合物，在它旁边的板块很好的解决分离了。 TLC溶剂的选择 当需要确定溶剂的最佳溶剂或混合溶剂（即“溶剂体系”）制定装有未知混合物TLC板或层析柱时，改变几个试验所用溶剂的极性来运行：反复实验的过程。仔细观察和记录在各溶剂系统层析的结果。你会发现，当你增加溶剂体系的极性，混合物的所有组分移动得更快（反之亦然），理想的溶剂体系是简单的系统，提供了最好的分离。 TLC洗脱模式通常延续到柱层析洗脱模式。由于薄层色谱是一个比柱色谱快得多的过程，薄层经常被用来确定柱层析的最佳溶剂系统。例如，在确定溶剂系统的快速色谱分离过程中，理想的系统是混合物的所需组分在TLC 上的Rf为0.25-0.35，和从它的相近TLC分离组分的Rf至少0.20。因此混合物用TLC分析，以确定理想的溶剂（S）的快速层析过程。 初学者往往不知道从哪里开始：他们应该使用什么溶剂洗脱TLC板？因为毒性，成本，和可燃性方面的考虑，通常的溶剂是己烷（或石