总皂苷测定中更换树脂可行性探究.docVIP

总皂苷测定中更换树脂可行性探究【中图分类号】 R94 【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)04－0261－01 【摘要】本文对《保健食品检验与评价技术规范》2003年版 保健食品中总皂苷测定方法中应用树脂更换进行了研究，将成本昂贵，不易取得的Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司、U.S.A更换为D-101大孔吸附树脂，并对两种树脂测定结果进行了对比，结论是可替换为D-101大孔吸附树脂。 【关键词】总皂苷，D-101大孔吸附树脂；Amberlite-XAD-2大孔树脂。 目前，我国保健食品中总皂苷的测定应依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版 保健食品中总皂苷测定方法测定。该测定方法规定应用的树脂为Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司、U.S.A。该树脂为一种进口树脂，价格昂贵，不易购买，给实验带来不便。资料表明，该种树脂结构与D-101大孔吸附树脂相似，且性质相近，故本实验拟将Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司、U.S.A更换为D-101大孔吸附树脂，并进行对比，以降低实验成本，提高实验效率。? 1 试剂、试药与仪器 1.1 试剂、试药 1.1.1 D-101大孔吸附树脂； 1.1.2 Amberlite-XAD-2大孔树脂，Sigma化学公司、U.S.A。 1.1.3 中性氧气铝 层析用，100-200目； 1.1.4 无水乙醇 分析纯； 1.1.5 高氯酸 分析纯； 1.1.6 冰乙酸 分析纯； 1.1.7 5 %香草醛冰乙酸溶液 称取5g香草醛，加冰乙酸溶解并定容至100ml； 1.1.8 人参皂苷Re标准品 购自中国药品生物制品检定所； 1.1.9 人参药材 1.2 仪器 1.2.1 UV-2501 PC紫外/可见分光光度计； 1.2.2 超声波提取器； 1.2.3 比色皿； 1.2.4 层析柱； 1.2.5 微量吸液器。? 2 实验步骤 2.1 样品与对照品处理：取人参药材100g，加70%乙醇回流提取2小时，滤液回收乙醇，浓缩至密度为1.20左右，称重，计算收膏率，称取人参浸膏2.0g,精密称定，置100ml量瓶中，加纯化水适量，超声使溶解，定容，滤过，分别精密移取续滤液1.0ml，置于10mL容量瓶中，加纯化水至刻度，摇匀，滤过，分别吸取滤液1.0mL于两种大孔树脂柱进行柱层析。精确称取人参皂苷Re标准品20mg，用甲醇溶解并定容至10ml，即每毫升含人参皂苷Re2.0mg。 2.2 大孔树脂的前处理：分别将实验用量的Amberlite-XAD-2大孔树脂和D-101大孔吸附树脂置于直径为3cm,长度为50cm的层析柱中，乙醇浸泡24h→用乙醇洗至流出液与水1：5不浑浊→用水洗至无醇味→5%HCl通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性→2%NaOH通过树脂柱，浸泡2-4h→水洗至中性，备用。 2.3 柱层析：用10mL注射器作层析管，分别装3cmD-101大孔吸附树脂和Amberlite-XAD-2大孔树脂，上加1cm中性氧气铝。先用25mL70%乙醇洗柱，弃去洗脱液，再用25mL水洗柱，弃去洗脱液，精确加入1.0mL上述已处理好的样品溶液，先用25mL水洗柱，弃去洗脱液，再用25mL70%乙醇洗脱人参皂苷，收集洗脱液于蒸发皿中，置于60℃水浴挥干，以此作显色用。 2.4 显色：在上述已挥干的蒸发皿中准确加入0.2mL5%香草醛冰乙酸溶液，转动蒸发皿，使残渣溶解，再加入0.8mL高氯酸，混匀后移入5mL带塞刻度离心管中，60℃水浴上加热10min，取出，冰浴冷却后，准确加入冰乙酸5mL，摇匀后，以1cm比色皿于560nm波长处与标准管一起进行比色。 2.5 标准管：吸取人参皂苷Re标准溶液（2.0mg/mL）100?l放蒸发皿中，放于60℃水浴挥干，以下操作从”2.3柱层析……”起，与样品相同。测定吸光度值。 3 结果? 树脂类型 总皂苷含量（mg/g） Amberlite-XAD-2大孔树脂 103 D-101大孔吸附树脂 106 4 结论与讨论 4.1 由实验结果可见，两种树脂测定总皂苷实验结果无显著性差异，故可将Amberlite-XAD-2大孔树脂替换为D-101大孔吸附树脂进行保健食品中总皂苷的测定。 4.2 大孔树脂经预处理，放置一段时间未使用，使用前不必完全按照原方法进行预处理，可在95%乙醇中浸泡过夜，用纯水冲至无醇味即可。 4.3 对照品液蒸干后，转移上柱，方法中未标明转移用溶剂，我们采用的是纯