护肝功能之评估方法.docVIP

健康食品之護肝功能評估方法 (針對化學性肝損傷) 壹、前言 肝臟為人體最大、機能最複雜的重要代謝器官。它在醣、脂質、蛋白質、維生素、激素、膽汁等物質代謝中，均有重要作用；同時肝臟還有分泌、排泄、生物轉化等方面的功能。肝細胞含有豐富的肽，並合成許多肽和某些凝血因子，儲存和釋放造血因子，參與血液凝固和造血過程。肝臟也是機體重要屏障器官，其解毒功能對機體有重要保護作用。當肝功能損傷時則代謝障礙，並影響其他臟器功能，嚴重則危及生命。肝臟具有肝動脈和門靜脈的雙重血液供應，並擁有大量血竇，肝細胞膜能直接與血液接觸，同時肝細胞膜的通透性又較大，故肝細胞與血液進行活躍有效的物質交換。很多有毒物質易引起肝細胞損傷，肝具有強大再生和代償能力，對輕度或局限性損傷往往不致造成肝功能障礙。肝臟對各種致病因子的反應方式，主要是肝實質細胞和星狀細胞增生與肝實質細胞的變性和壞死，以及肝間質的滲出和增生。當肝細胞壞死，而剩餘肝細胞再生的情況下，則發生纖維增生導致肝硬化。在肝硬化時使靜脈血流受阻，導致肝靜脈與門靜脈壓上升，促進肝內動靜脈吻合支的形成，致使肝細胞供血減少，進而發生變性或壞死、纖維增生，肝硬化更加嚴重，這樣形成惡性循環。當肝嚴重損傷，且代償能力顯著減弱時，則出現嚴重肝功能障礙稱肝功能不全，進一步發展則肝功能衰竭，引起中樞神經系統功能障礙，出現肝昏迷。中醫學認為肝的主要功能藏血、主魂、主目、主筋膜和主疏泄，與脾胃的升降密切相關，與膽互為表裡。肝氣鬱結則出現脅肋脹滿、精神抑鬱、納食不化、脘痞腹脹，甚則黃疸等症候。 國人肝臟疾病罹患率甚高，慢性肝病及肝硬化為十大死亡原因之第六位，每年死亡人數在三千人以上。造成肝臟疾病之主要因素有病毒性、酒精性與化學性三大類，而在老鼠動物模式之病理切片中與人體有一致之病理現象者為化學性肝損傷。由於造成病毒性、酒精性肝損傷之動物模式不易建立，因此本評估方法僅針對化學性肝損傷進行護肝功能之評估。所以本評估方法之進行主要是以四氯化碳（CCl4）誘導大（小）白鼠慢性肝損傷的實驗模式，探討不同試驗樣品之處理對於大（小）白鼠慢性肝損傷之影響。四氯化碳誘導肝損傷之原理，主要是因四氯化碳受肝微粒酵素活化成三氯甲烷自由基，然後與蛋白質結合導致蛋白質合成受阻，並引起脂質分解代謝失調，引起肝細胞內三酸甘油酯蓄積，另外三氯甲烷自由基形成過氧化物，導致脂質過氧化而使得肝細胞膜損傷，造成肝中酵素滲出及細胞病變而壞死。本評估方法將於日後再予以適當增加肝功能評估項目，以加強肝功能評估之完整性。另外，本評估方法目前僅針對化學性肝損傷進行護肝功能之評估，未來陸續將病毒性、酒精性肝損傷護肝功能之評估方法納入。 貳、實驗項目與實驗方法 一、實驗設計： 將研究組別【每組10-12隻雄性SD或Wistar大白鼠（200-250克）或ICR小白鼠（20-25克）】分為1.正常對照組：正常飲食組；2.負對照組：四氯化碳處理組；3.正對照組：Silymarin處理組；實驗組：試驗樣品處理組（需有二種或以上劑量組，其中之一為人體建議攝取量，另一組則為人體建議攝取量之5-10倍左右） 四氯化碳誘導大（小）白鼠慢性肝損傷的方法(Lin et al.,1993)： 1.實驗方法：四氯化碳誘發大（小）白鼠慢性肝損傷實驗模式，本方法中之四氯化碳使用劑量僅供參考。 實驗前將大（小）鼠以亂數法大別為至少四組，每組10-12隻： A組為正常對照組：I.P.或灌食olive oil (or corn oil) 十 Normal saline or d.d.H2O (P.O.) B組為負對照組（肝損傷組）：I.P. (40％ CCl4／olive oil or corn oil) 或灌食(20％ CCl4／olive oil or corn oil) 十 Normal saline or d.d.H2O (P.O.) C組為正對照組（Silymarin治療對照組）：I.P. (40％ CCl4／olive oil or corn oil) 或灌食(20％ CCl4／olive oil or corn oil) 十 Silymarin (P.O.) D組為實驗組：I.P. (40％ CCl4／olive oil or corn oil) 或灌食(20％ CCl4／olive oil or corn oil)