Luminol-H2O2化学发光体系检测铁蛋白.pdfVIP

第 29卷 第 3期 河北大学学报(自然科学版) Vo1．29NO．3 2009年 5月 JournalofHebeiUniversity (NaturalScienceEdition) M ay2009 Luminol—H2O2化学发光体系检测铁蛋白 李正平，韩 军，吕学冲，刘秀贤 (河北大学 化学与环境科学学 院，河北 保定 071002) 摘 要 ：酸性介质 中，铁蛋白(Ferritin)催化 luminol—H。O。反应并产生很强的化学发光 (CL)信号．基于 此，建立 了简便灵敏 的化学发光检测铁蛋 白的分析方法，其线性范围为 0．5～10t~g／L，检 出限 (3a)为 0．36t~g／L，为铁蛋白作为纳米粒子标记物并直接检测提供 了一种新的途径． 关键词 ：化学发光；铁蛋 白；鲁米诺 中图分类号：O657．39 文献标识码 ：A 文章编号 ：1000—1565(2009)03--0274—04 DeterminationofFerritinwithLuminol-H2OzChemiluminescenceSystem LIZheng—ping，HANJun，LOXue—chong，LIUXiu-xian (CollegeofChemistryandEnviromentalScience，HebeiUniversity，Baoding071002，China) Abstract：Inacidicmedium，Ferritincancatalyzeluminol—H2O2chemiluminescence(CL)reactionand producestrongCL signa1．Basedonthisphenomenon，asimpleandsensitivemethodforFerritindetermi— nationhasbeendeveloped．TherewasagoodlinearrelationshipbetweentheCL intensityandtheconcen— trationofFerritinintherangeof0．5～10gg／L，andthedetectionlimit(3o)was0．36t~g／L．Theproposed methodoffersanew approachfordirectdetectionofFerritinaslabelednanoparticles． Keywords：chemiluminescence；ferritin；luminol 铁蛋白(Ferritin)是参与和维持铁代谢平衡的重要功能蛋 白，它是一类广泛存在于动植物及微生物细 胞中含高铁量的蛋白质．在人体 内，铁蛋白主要的生物功能是储存机体中的过剩铁 ，避免产生铁中毒或释 放铁给需铁细胞 ，用于体 内合成含铁 的蛋 白质或酶_1]． 铁蛋 白由蛋白壳和铁核2部分组成 ，为外壳直径 11～13nm、内壳直径7～8nm的蛋白质纳米粒子 ，脱 去铁核后的蛋 白壳称为脱铁铁蛋白(Apoferritin)．很多研究小组利用脱铁铁蛋 白制备出内含不同物质的各 种纳米粒子 (Marker—loadedApoferritinNanoparticle)，并应用于 DNA杂交及蛋 白质免疫分析 中的标记 物[4--73．如果能将铁蛋 白直接作为标记的纳米粒子，可以避免制备包裹各种物质的脱铁铁蛋 白的复杂过程． 目前，铁蛋白的测定主要采用酶联免疫分析 (ELISA)法[8]，这种方法步骤复杂 ，带来误差的环节较多；增强 化学发光，酶联免疫法虽然使检测的灵敏度有所提高，但仍然不能避免步骤繁多的缺点[9]，所以酶联免疫法 不适用于各种生物标记的检测．笔者发现铁蛋 白在酸性介质中能直接催化 luminol—HzOz的反应 ，并产生强 烈的化学发光 ，由此研究建立了简便 、灵敏测定铁蛋白的化学发光分析法 ，为铁蛋白直接作为标记纳米粒 子 的应用提供 了一条新的检测途径． 收稿 日期 ：2008一O9—18 基金项 目：河北省 自然科学基金资助项 目(B2OO6OOO967) 第一作者：李正平 (1965一)，男，河北易县人，河北大学教授，博士生导师，主要从事分子发光及生化分析研究 第 3期