PCR_SSCP标记技术研究及应用进展.pdfVIP

第 15 卷　第 4 期 山 东 科 学 V o l15　N o 4 2002 年 12 月 　　　　　　　　 SHAN DON G SC IEN CE 　　　　　　　　　 D ec2002 文章编号:(2002) 0400 1805 PCR SSCP 标记技术研究及应用进展 韩秀兰, 沈法富 ( 山东农业大学农学院, 山东 泰安 27 10 18) 摘要: ( , 聚 PCR SSCP Po lym era se Ch a in R eact ion Single Stran d Com fo rm at ion Po lym o rp h ism ) 合酶链反应单链构象多态性 是基于 PCR 的单链构象多态性分子标记技术, 可用于DN A 已 知突变或未知变异分析。该技术具有快速、简便、灵敏的特点, 可有效检测出碱基置换、缺失、 插入等基因变异。本文介绍了该技术的原理、技术改进及其应用的新进展。 关　键　词: PR CR SSCP; 原理; 研究进展; 应用 中图分类号: Q 78　　　　　文献标识码: A 80 年代以来, 随着分子生物学技术的发展, 出现了一类重要的遗传标记—— 分 DN A 子标记。 分子标记是以个体间核苷酸序列变异为基础的遗传标记, 是 水平遗 DN A DN A 传变异的直接反映。通过对分子标记的深入研究, 还将最终达到在DN A 水平上直接操纵 有益基因的目的。 [ 1 ] 1984 年, 日本学者金泽等 对获得的大肠杆菌正常和突变 1- 基因, 酶切后 F A T P a se 进行电泳分析发现, 含点突变的DN A 小片段在中性聚丙烯酰胺凝胶中的单链电泳迁移 率与相应正常的DN A 小片段的单链电泳迁移率明显不同。相同长度的DN A 片段即使一 个碱基不同, 经中性聚丙烯酰胺凝胶电泳时, 单链迁移率也会不同。人们把这种由于碱基 序列的差异表现出的多态现象叫作 的单链构象多态性( DN A Sing le strand Confo rm at ion Po lym o rp h ism , SSCP ) 。这一发现为单核苷酸变异的检测开辟了新途径。1989 年, 日本学者 [2 ] O r ita 等 将此法用于检测复杂基因组单拷贝DN A 中的多态现象, 他们认为 SSCP 可以 检测任何位点的点突变, 有助于对遗传变异的诊断