35年狼疮性肾炎临床及基础探究.docVIP

35年狼疮性肾炎临床及基础探究 　摘要　本研究在国内首次发现异常增高的循环白介素-6可导致狼疮性全身性病理损 害；白介素-6异常增高在狼疮性小管间质损害过程中可能具有重要作用；白介素- 6及其信息传递中的GP130,JunB基因异常表达参与了弥漫性增生性狼疮性肾炎(LN) 分子发病过程，并率先发现丹参通过增强c-myc蛋白高水平表达而诱导细胞凋亡， 从而对人肾成纤维细胞增殖产生抑制作用。在国内外首次证实巨噬细胞在LN的病人 肾脏局部增殖，且和疾病严重程度呈正相关。首次发现白介素受体(sIL-2R)和FLC T增多是诊断早期活动LN的可靠指标。筛选并建立了一种本病活动性的计分方法； 发现小管间质病变分级对LN肾小球病理、临床表现、治疗、疗效及复发的判断均有 指导意义。在国内首先报道超大剂激素冲击疗法治疗严重的活动性LN，率先提出适 合我国国情的改进CTX冲击疗法治疗LN。发现中药在促进骨髓造血，对抗CTX等致免 疫功能过度抑制具有一定作用。首次在国内探讨了LN尿毒症的可逆性，并分析发现 SLE死亡最主要原因并非尿毒症。 狼疮性肾炎(LN)是一种临床常见的自身免疫性疾病，严重影响着人民的健康。 由于其诊断治疗较为棘手，发病机制仍不明确，因此LN的研究一直受到国内外学者 的重视［1～9］，我们课题组对此病作了30多年的临床和实验研究，于1963年在国 内最早分析了当时国内最大组别的系统性红斑狼疮(SLE)［10］，以后不断地进行 临床观察和研究。近年来随着细胞分子生物学技术的发展，我们对其分子发病机理 与临床进行了综合研究，现总结如下。 1　发病机理 1.1　白细胞介素-6 白细胞介素-6(白介素-6)与LN发病机理仍然尚不十分清楚，为了确定LN病人体 内是否存在内源性白介素-6表达增高及其来源，我们应用ELISA法检测58例LN病人 的血清及外周血单个核细胞(PBMC)内白介素-6蛋白的水平［11］，在国内首次采用 原位杂交方法结合IBAS 2.0图像分析系统，检测其中20例LN病人PBMC在未受任何刺 激时白介素-6 mRNA表达强度，并分析3者之间的关系。结果表明该3者水平在LN病 人体内均异常增高，活动期尤其明显，3者之间互呈直线正相关。提示LN病人PBMC 内源性过度表达和合成白介素-6是其外周白介素-6水平增高的原因之一，异常增高 的循环白介素-6对狼疮性全身性病理损害，尤其对肾损害具有重要的作用，同时证 明血清白介素-6增高可提示LN处于活动期，对临床指导治疗有一定意义。另外，我 们探讨了白介素-6在狼疮性小管间质病变中的作用［12］，通过检测42例活动期L N患者尿白介素-6水平与其中的15例肾小管间质白介素-6 mRNA水平，发现42例活动 期LN患者中有36例尿白介素-6肌酐比值＞5 ng/mg，其增高程度与尿微球蛋白(β 2-MG)及NAG酶活性水平呈显著正相关；在15例肾组织切片中，肾小管间质均有白介 素-6 mRNA表达，小管间质病变愈严重，其表达量愈高，而健康肾组织小管间质几 乎无白介素-6 mRNA表达。提示LN患者活动期尿白介素-6水平异常增高与肾小管间 质白介素-6 mRNA异常表达有关，白介素-6在狼疮性小管间质损害过程中可能具有 重要作用。 有关白介素-6信号传递系统中GP130和JunB是否参与了弥漫性增生性LN的分子 病理过程目前国内外尚无报道。我们采用原位杂交技术观察了20例弥漫性增生性L N患者肾活检组织肾小球细胞中白介素-6、GP130和JunB mRNA表达，并分析其与患 者肾小球系膜区增宽和尿蛋白之间的关系［13］，结果在国内外首次发现弥漫性增 生性LN患者白介素-6、GP130 JunB基因mRNA表达分别是6.6±0.9，8.6±0.9和6.7 ±0.8，较对照组明显增加(P＜0.01)；白介素-6、GP130 mRNA表达与系膜区增宽和 尿蛋白排泄量呈正相关。提示白介素-6及其信息传递中的GP130和JunB基因异常表 达在弥漫性增生性分子发病机理中起一定作用，为LN的分子病理机制提供了新的实 验依据。 1.2　细胞凋亡 近年来，细胞凋亡理论的引入为LN发病机制的研究开拓了一个新的领域。LN与 细胞凋亡之间具有密切的相关性［14］。我们率先在国内成功分离培养LN患者肾活 　 检组织的成纤维细胞，探索环磷酰胺能否通过诱导细胞凋亡来减轻纤维化病变，观 察环磷酰胺衍生物4-氢过氧环磷酰胺(4-hydroperoxycyclophosphamide,4-HC)对L N患者肾间质成纤维细胞凋亡的影响［15］，结果发现4-HC可明显促进其凋亡，这 为临床应用环磷酰胺治疗LN、减轻肾间质纤维化和延缓肾功能恶化，提供新的实验 证据。另外检测了丹参(ρ=10 g/L或20 g