18株铜绿假单胞菌耐药谱及ERIC-PCR分型.docVIP

18株铜绿假单胞菌耐药谱及ERIC-PCR分型 　 作者：伍晓锋 黎毅敏 卓超 袁锦屏 杨灵 任筱 【摘要】 目的 研究产金属β-内酰胺酶(MBL)的铜绿假单胞菌感染的菌株同源性和耐药谱。方法 用纸片协同法筛选出产MBL铜绿假单胞菌株；琼脂扩散法检测MBL阳性株对10种抗菌药物的药敏结果；用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应(ERIC-PCR)方法确定菌株之间的同源性。结果 纸片协同法试验检测到18株MBL阳性菌株，它们对头孢噻肟、头孢曲松、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶完全耐药，对10种抗菌药物呈现7种耐药模式；ERIC-PCR结果显示，18株MBL阳性株呈现4种基因型，15株为同一基因型。结论 该院ICU内产MBL铜绿假单胞菌在2005年第二季度出现暴发流行。 【关键词】 铜绿假单胞菌； 聚合酶链反应； 基因间重复一致序列引物； 金属β-内酰胺酶； 耐药谱 ABSTRACT Objective To study the homology and resistant pattern of metallo-β-lactomase (MBL) producing Pseudomonas aeruginosa. Method Disk diffusion test was used to screen MBL producing isolates from Pseudomonas aeruginosa strains, and antibiotic susceptibility were detected by KB test. The homology among different strains was tested by enterobacterial repetitive intergenic consensus-PCR (ERIC-PCR) method. Results Eighteen strains of Pseudomonas aeruginosa producing MBL were isolated from patients in ICU. Antibiotic susceptibility data showed that all 18 strains were resistant to cefotaxime，ceftriaxone, ticarcillin/clavulanic acid, cefoperazone/sulbactam and ceftazidime, and there were seven drug-resistant profiles according to the susceptibility results of 10 antimicrobial agents. Results of ERIC-PCR genotyping showed that there were four PCR patterns, and 15 strains were in the same pattern. Conclusions The MBL producing strains in Pseudomonas aeruginosa appeared an outbreak in ICU in 2005. KEY WORDS Pseudomonas aeruginosa; ERIC-PCR; Resistant spectrum; Metallo-β-lactamase 铜绿假单胞菌感染主要见于医院感染人群，尤其是重症监护病房(ICU)中的重症患者，是目前各种感染中最广泛、最严重的问题之一。随着能够水解碳青霉烯类抗生素的金属β-内酰胺酶(MBL)的产生，对碳青霉烯类抗生素及三代头孢菌素耐药铜绿假单胞菌的分离率日渐增多，给临床抗菌治疗已带来极大的困难。2005年4月至2005年6月，广州某三甲医院ICU从不同患者深部痰中持续分离出多重耐药的铜绿假单胞菌，其耐药谱基本相似，为明确这些分离株之间是否密切相关，采用ERIC-PCR分析同源性，并调查是否携带有金属β-内酰胺酶。 1 材料和方法 1.1 菌株来源 2005年4月至2005年6月从广州某三甲医院ICU患者深部痰中分离的铜绿假单胞菌23株，试验前重新鉴定。质控标准参考菌株：铜绿假单胞菌ATCC27853，来自美国菌种收藏中心。 1.2 MBL鉴定试验 采用文献［1］报道的纸片协同法确认产MBL铜绿假单胞菌，挑取少量细菌稀释在生理盐水中，使浓度为1.5×108CFU/ml，将菌液均匀涂抹于MH平板上，MH平板上一侧贴滤纸片，并加10μl EDTA(100mmol/L)，滤纸两边1.5cm处分别贴30μg