一种新型海洋来源蒽环类化合物D19抗肿瘤活性及机制探究.docVIP

一种新型海洋来源蒽环类化合物D19抗肿瘤活性及机制探究 　 作者：袁洁,何振健,吴珏珩,朱勋 【摘要】 目的探讨新型海洋源性蒽环类化合物D19的抗肿瘤作用及分子机制。方法 采用四甲基二氮唑蓝(MTT)比色法、脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)、免疫印迹法(Western Blotting)检测D19对人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-435生长的影响及相关信号通路蛋白的变化。结果 D19对MCF-7、MDA-MB-435的半数抑制浓度(IC50)分别为4.01 μmol/L和7.32 μmol/L;D19具有有效诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用;Western Blotting结果显示D19作用后细胞中的凋亡蛋白如caspase 9以及下游的效应蛋白PARP都发生裂解。结论 从细胞水平和分子水平证明新型海洋源性蒽环类化合物D19具有很强的抗乳腺癌活性，有可能发展成为治疗乳腺癌等其他实体肿瘤的先导化合物。 【关键词】 海洋共生微生物;抗肿瘤;蒽环类化合物;人乳腺癌细胞;凋亡 　　Abstract:ObjectiveTo study the antineoplastic activity and mechanism of D19,a novel anthracycline derived from marine commensal microorganisms at both cellular level and molecular level. Methods The inhibitory effects of D19 on growth of breast cancer cell lines were determined by MTT assay. The molecular signaling pathways of apoptosis were measured by terminal deoxynucleotidyl transferase (TDT)-mediated biotinylated deoxyuridine-triphosphate (dUTP)-biotin nick end labeling (TUNEL) staining and western blotting. Results IC50 of D19 on MCF-7 and MDA-MB-435 cell lines were 4.01 μmol/L and 7.32 μmol/L respectively. TUNEL staining showed that D19 could induce apoptosis in MCF-7 cells. In addition,Western blot detected some apoptosis proteins such as caspase 9 and PARP being cleaved after treatment with D19. Conclusion These results suggested that D19 might be used as a promising chemotherapeutical agent for patients with breast cancer and other solid cancer. 　　Key words:marine commensal microorganism;antineoplastic;anthracycline;human breast cancer cells;apoptosis 　　长期以来，恶性肿瘤一直严重威胁着人类健康与生命。据世界卫生组织统计，全世界每年约有600万人被癌症夺去生命，估计到2020年将升至1 000万人[1]。其中乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，而且是实体瘤中应用化疗最有效的肿瘤之一。因此寻找有效的抗肿瘤化合物对于乳腺癌的治疗具有重要的意义。蒽环类化疗药物是目前临床应用广泛的抗肿瘤一线化疗药物，尤其是乳腺癌化疗中最常用的药物，但是此类药物仍存在骨髓抑制性、心脏毒性问题，以及肿瘤患者长期使用出现的多耐药现象，大大限制了其剂量提高和临床治疗效果[2-4]。因此，有必要寻找更好的同类化疗替代药物[5]。本文从分子水平和细胞水平对海洋微生物来源的蒽环类化合物D19抗人乳腺癌作用进行了研究，为该化合物最终成为抗肿瘤药物提供理论依据，并为进一步开发高效低毒的抗肿瘤新型候选药物奠定基础。 　　1材料与药物 　　人乳腺癌细胞系MDA-MB-435、MCF-7为本实验室保存，并已在本实验室已发表的其他研究项目中使用[6]。D19由中山大学