中药心复康在大鼠急性心肌梗塞后对移植骨髓间充质干细胞保护作.docVIP

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中药心复康在大鼠急性心肌梗塞后对移植骨髓间充质干细胞保护作

中药心复康在大鼠急性心肌梗塞后对移植骨髓间充质干细胞保护作   作者:李广斌,苏金玲,姜希娟,范英昌 【摘要】 目的探讨中药心复康在大鼠急性心肌梗塞后对移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)的保护作用及其机制。方法经密度梯度离心联合贴壁筛选法培养并纯化BMSCs,采用冠状动脉结扎法建立大鼠急性心肌梗塞模型,移植前以5-溴脱氧尿核苷(Brdu)对移植细胞进行标记,术后采用中药心复康灌胃联合干细胞移植治疗。移植后2周ELISA法检测大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)含量;处死动物,免疫组织化学方法检测心肌损伤区VEGF蛋白表达情况、Brdu阳性移植细胞数和CD34+新生血管数。结果心复康联合干细胞移植治疗大鼠心肌梗塞,能提高移植细胞存活率(与细胞移植组比较Plt;0.05),提高大鼠血清VEGF含量(与细胞移植组比较Plt;0.05),提高梗塞区VEGF蛋白表达,增加梗塞区新生血管数量。 结论中药心复康对大鼠急性心肌梗塞后移植干细胞有明显的保护作用,其机制可能与心复康联合干细胞移植能更有效地促进损伤区血管新生有关。 【关键词】 心复康;心肌梗塞;骨髓间充质干细胞;血管新生   Abstract:ObjectiveTo discuss the protective action on transplanted BMSCs by Chinese traditional medicine XinFuKang(XFK) after rats acute myocardial infarction. MethodsBMSCs were cultured and purified by gradient centrifugation -adhesive method. The rats with acute myocardial infarction were built by coronary artery ligation. Before transplation, BMSCs were signed by Brdu, and after the OPS of coronary artery ligation, the therapy methode was XFK combining BMSCs transplantation. After 2 weeks, we measured serum VEGF by method of ELISA, the albumen VEGF, cell amount of Brdu(+) and neonatal vessels of CD34+ around the infarct area by method of IHC. ResultsThe method of XFK combining BMSCs transplantation increased livability of transplanted BMSCs and serum VEGF(compared with group of BMSCs tranplation,Plt;0.05), enhanced infarct area albumen VEGF and neonatal vessels. ConclusionCompared with simply BMSCs transplantation, XFK hase better protection on the transplanted BMSCs. The mechanism maybe XFK can promote the vessels regeneration of infarct area.   Key words:XinFuKang; Myocardial infarction; BMSCs; Vessel regeneration 心肌梗塞是心肌的急性坏死,病情凶险,病死率较高。目前,骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗急性心肌梗塞显示了良好的应用前景 。本研究考虑,干细胞移植治疗心肌梗塞的前提首先应该是干细胞本身在移植后能够顺利的成活下来,其存活率必然影响其作用的发挥。最近,中药联合骨髓干细胞移植治疗心肌梗塞取得了令人鼓舞的进展,显示出中药在干细胞移植过程中存在的特有优势:毒副作用小,促进干细胞增殖、分化等[1,2]。故本实验采用中药心复康干预骨髓间充质干细胞移植治疗实验性大鼠心肌梗塞,以观察中药心复康对大鼠心肌梗塞后移植骨髓间充质干细胞的保护作用。   1材料 Wistar大鼠,雄性,体质量150~250 g(军事医学科学院第四研究所动物实验中心),L-DMEM培养基(美国GIBCO公司),胎牛血清(FCS,美国Hyclone公司),胰蛋白酶(

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