高中生物-1.3-测定微生物的数量课件-中图版选修1.pptVIP

* 第三节 测定微生物的数量 血球计数板的构造 课程标准 1．测定某种微生物的数量。 2．用土壤浸出液进行细菌培养，仅以尿素为氮源，测定 能生长的细菌的数量。 课标解读 1．了解测定微生物数量的原理和方法。 2．观察菌落数，进行微生物数量的统计。 3．理解稀释平板计数法的原理和操作过程。 测定微生物数量的方法可分为两类：___________和_____ _______。 (1)常用方法 直接计数法中常用的是_________________ ，这种方法是先将待测样品制成_____，然后取一定量的悬液放在_______下进行计数。 测定微生物数量的方法 1．测定微生物数量的方法 2．直接计数法 直接计数法 间接 显微镜直接计数法 悬液 显微镜 计数法 (2)特点 该法所需_________，可迅速得到结果，而且在计数的同时能观察到所研究微生物的_________ 。其缺点是难以计数___________。这种方法一般适用于_______悬浮液中各种____________的计数。 间接计数法最常用的是_______________，它是根据微生物的_________而设计的计数方法。在样品中含菌数_____的情形下，也可以完成计数。 3．间接计数法 设备简单 形态特征 微小的细菌 纯培养 单细胞菌体 稀释平板计数法 培养特征 较少 (1)常用方法：显微镜直接计数法。 1．直接计数法 (2)过程：先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。显微镜直接计数示意图如右： (3)优点：所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征。 (4)缺点：难以计数微小的细菌。 (1)间接计数法最常用的是稀释平板计数法，它是根据微生物的培养特征而设计的计数方法。 2．间接计数法 (2)过程：将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开。再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内；或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至45 ℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培养皿中，摇匀、静置待凝。经过培养后，就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样的一个菌落就代表着一个微生物个体。统计培养基中出现的菌落数，即可推算出检测样品中的活菌数。 (3)优点：在样品中含菌数较少的情形下，也可以完成计数。 (4)缺点：由于死亡的细菌不能繁殖产生菌落，所以稀释平板计数法只计数活菌数，故又称活菌计数法。 特别提醒 设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布器将菌液涂布在整个平板表面，放在适宜的温度下培养计数菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度菌液加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。 显微镜直接计数法的优点是 (　　)。 A．直接观察不存在误差 B．难以计数微小的细菌 C．所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数的同时 能观察到所研究微生物的形态特征 D．所需设备复杂，还要用到细菌计数板，统计结果误差 大 答案　C 【巩固1】 土壤中微生物的_____和_____极其丰富，它们对提高___ _______有重要作用，因此，测定土壤中的_____量可以作为判定土壤_____的一个重要指标。 取土壤表层______ cm处的土样。称取__g土样，放入盛有___ mL无菌水的锥形瓶中，制成___倍的稀释液。 土壤中好气性细菌的计数 1．测定土壤含菌量的意义 2．制备土壤稀释液 种类 数量 土 含菌 肥力 5～10 1 99 102 壤肥力 用___________3支，分别吸取稀释倍数为___、___、 ___的土壤稀释液各___ mL，注入到相应编号的培养皿中。将已灭菌_________________培养基溶化、冷却至_______℃左右时，倾入到上述各培养皿中。 待这些接种好的平板培养基冷却后，_____放入_______℃的恒温箱中培养_______h，直至长出菌落为止。 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有________个菌落为宜。霉菌以每个培养皿内有________个菌落为宜。 3．取样及倒平板 4．培养 5．选取具有合适菌落的稀释倍数并计数 无菌移液管 104 105 106 0.2 牛肉膏蛋白胨琼脂 45～50 倒置 28～30 24～36 30～300 10～100 将统计出的菌落数按下列公式计算，得出每克样品菌数。 6．计算 1．土壤中好气性细菌的计数 土壤中好气性细菌