反相高效液相色谱法测定吸入用异丙托溴铵溶液含量.docVIP

反相高效液相色谱法测定吸入用异丙托溴铵溶液含量 　 作者：卢来春，张蓉，刘同华，蒋学文 毕业论文 【摘要】; 目的: 采用反相高效液相色谱法测定吸入用异丙托溴铵溶液的含量。方法: 色谱柱为 phenomenex?C8 （4.6 mm×250 mm， 5 μm），流动相为乙腈?0.25%庚烷磺酸钠溶液（29∶71）用磷酸调pH值至3.2；检测波长为210 nm；流速为1.0 mL/min；进样量20 μL。结果:异丙托溴铵在12.8～256 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.9995，日间、日内RSD均小于1.5%。结论：本方法准确可靠，可用于吸入用异丙托溴铵溶液的质量控制 毕业论文 【关键词】; 异丙托溴铵；含量测定；高效液相色谱法 毕业论文 异丙托溴铵是一种具有抗胆碱能特性的四价铵化合物，可竞争性抑制乙酰胆碱对气道平滑肌的收缩作用。通过抑制细胞内cGMP生成，减少cAMP降解，降低细胞内钙离子浓度，使气道平滑肌松弛，肥大细胞释放炎性介质下降，终止气道扩张，呼吸阻力减小。吸入异丙托溴铵后，作用只限于肺部扩张支气管，而不作用于全身，主要采用气雾吸入给药［1］。吸入用异丙托溴铵溶液在临床上应用较广泛，主要采用压缩雾化吸入或超声雾化吸入给药，常用于预防和治疗儿童支气管哮喘。本文考察了异丙托溴铵含量的HPLC测定方法，为制剂的质量控制提供了方法学依据。 毕业论文 　　1; 仪器与材料 毕业论文 ; LC?10ATvp高效液相色谱仪（日本岛津公司）；异丙托溴铵对照品（购自浙江优联医药化工有限公司，经精制后色谱峰为单峰）；吸入用异丙托溴铵溶液（爱全乐）购自德国勃林格殷格翰国际公司（批号638066，规格为含异丙托溴铵2 mL∶500 μg）；庚烷磺酸钠为离子对色谱试剂，纯度≥99％，购自上海亿日化工科技有限公司；乙腈为色谱纯；其它试剂为分析纯。 毕业论文 　　2; 含量测定 毕业论文 　　2.1; 色谱条件 毕业论文 ; 参照文献［2?4］，选定试验条件为：C8色谱柱（phenomenex?C8 5 μm，4.6 mm×250 mm）；流动相为乙腈?0.25%庚烷磺酸钠溶液（29∶71）用磷酸调pH至3.2；检测波长为210 nm；流速为1.0 mL/min；进样量20 μL。 毕业论文 　　2.2; 对照品贮备液的制备 毕业论文 ; 精密称取在五氧化二磷干燥器中减压干燥24 h的异丙托溴铵对照品12.80 mg，精密称定，置10.0 mL量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1.28 mg/mL的异丙托溴铵对照品液，备用。 毕业论文 　　2.3; 供试品溶液的制备 毕业论文 ; 取本品15瓶，合并内容物，混匀，精密量取10 mL，置50 mL量瓶中，加0.001 mol/L盐酸溶液?甲醇（1∶1）稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 毕业论文 　　2.4; 系统适应性试验 毕业论文 ; 取溴化钾适量，用流动相溶液溶解制成溴化钾溶液。精密吸取溴化钾溶液、“2.2”、“2.3”项下溶液适量，分别按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图1。由图1可知，与异丙托溴铵对照品比较，供试品异丙托溴铵色谱峰分离良好，符合高效液相色谱法的要求，且溴离子不影响本品含量测定。异丙托溴铵的出峰时间约在22 min。 毕业论文 　 　　2.5; 最低检测限和最低定量限 ; 取异丙托溴铵对照品适量，精密称定，加溶剂溶解并稀释制成供试液，按上述色谱条件取10 μL进样。经试验，当进样浓度为0.3 μg/mL时，信噪比为3∶1，即最低检测限为0.3 μg/mL×10 μL=3 ng；当进样浓度为1.1 μg/mL时，信噪比为10∶1，即最低检测限为1.1 μg/mL×10 μL=11 ng。 毕业论文 　　2.6; 线性范围考察 毕业论文 ; 取对照品储备液，分别精密吸取0.1、0.2、0.4、0.8、2.0 mL，置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，得浓度依次为12.8、25.6、51.2、102.4、256 μg/mL的系列标准溶液。照上述色谱条件，进样20 μL，以样品浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程为：A=5900.864C+16415，r=0.9995，线性范围为12.8～ 256 μg/mL。 毕业论文 　　2.7; 精密度试验 毕业论文 ; 分别取12.8、51.2、2560 μg/mL三种浓度的对照品溶液，于1 d内分别进样5次及5 d内分别进样5次，分别计算日内、日间RSD。结果见表1。表1; 精密度试验结果（略） 毕业论文 　　2.8; 样品溶液稳定性试验