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异位F1F0 ATP合酶及其及肿瘤血管生成关系 　【摘要】 异位F1F0 ATP合酶作为一个细胞表面受体，它可表达在血管内皮细胞表面黏合血管抑素(angiostatin，又称血管生成抑制素)，调节细胞表面ATP水平，进而影响血管内皮细胞的增殖和分化。血管抑素在低pH值时可以黏合并阻滞细胞表面的F1F0 ATP合酶，继而干扰其活动；籍此发挥强大的内皮细胞杀伤效应，在抑制肿瘤血管生成中起着重要作用。 【关键词】 内皮细胞 肿瘤的生长和转移依赖血管生成。关于血管生成抑制药物的筛选仍是当前热点。新研究的异位F1F0 ATP合酶作为一种内皮细胞表面血管源性受体已被识别。这种异位ATP合酶能催化ATP合成，在特定条件下可被血管抑素（angiostatin）抑制。当血管抑素发挥抑制作用时，内皮细胞会难以维持正常胞内pH值而死亡。 1 异位F1F0 ATP合酶概况 在线粒体内，通过在无机磷酸盐(Pi)和ADP之间制造一个高能化学联结带，ATP合酶可以将呼吸链产生的质子梯度能量转换为ATP。这个合酶复合物过去被认为是严格表达在线粒体内部，但近来很多报道认为：ATP合酶的构成部分也存在于细胞膜表面，它们可以作为多种配体的受体参与各种过程，如脂代谢调节、细胞增殖控制、细胞凋亡、内皮细胞分化以及肿瘤的免疫识别[1~3]。该复合物第一个区域是膜内F0区域（包含c10~c14环）。这个F0区域是一个旋转发动机，它能够使c10~c14环旋转；线粒体呼吸链所产生的质子电化学势能，驱动着这个旋转发动机[4]。ATP合成酶的第二个区域F1是起催化作用的，它由αβ二聚物合成的一种三聚物组成[5]。这两个区域分别被中心和外周的杆状单位所连接[6,7]。中心的杆状单位由γ、δ、ε亚单元构成，δ、ε两个亚单元将γ的一个末端耦合至c环上，这样c环可以和γ亚单元一起旋转[8,9]。丧失了F0区域的复合物，或者没有合酶活动的复合物通常被称为F1 ATP酶（F1）[10]。反之，一个完整的复合物被称为F1F0 ATP 合酶。 通过免疫荧光和电子显微镜技术，发现表达在细胞表面的线粒体蛋白[11]。有报道认为βF1亚单位作为一个细胞表面蛋白，它可以被非渗透性膜反应物生物素化，参与细胞毒素淋巴细胞的交互作用与某些催化作用[12]。而且，免疫荧光能测到F1的构成元件[13,14]。Kim等通过显微镜法、生化方法和细胞分级分离法，为F1在细胞表面的表达提供了有力的证据，并被扩展至成熟肝细胞、角化细胞和血管内皮细胞等。α、β亚单位也在许多肿瘤细胞株中被发现。就目前所知，虽然报道成熟细胞表达F1，但这种表达在组织切片中还没有被发现。可能的原因是：组织经固定后，抗原性F1F0的抗原决定簇变得不够稳定。 2 血管生成与血管生成抑制 肿瘤生长所需的新血管源于现有正常血管，过去我们称之为血管生成（Folkman,1971)。血管生成涉及到血管生成因子与血管生成抑制因子之间的调节失衡。受肿瘤所释放的可溶性血管生成因子影响，这些源于局部毛细血管、小动脉、小静脉的新生血管，会促使肿瘤超常规迅速成长。血管抑素作为一个天然血管生成抑制剂，已被证实可以抑制血管生成，并有效阻止肿瘤生长。Folkman提出了“血管生成开关”的概念，即存在一个信号网络平衡血管生成和血管稳定（angiostatic）；这个网络是基于一定数量的血管生成信号与血管稳定信号来运行的。 Folkman和OReilly等描述了以下现象，在某些肿瘤外科手术治疗中，经常可以见到原发肿瘤去除后，转移灶肿瘤仍迅速生长。这一现象已被许多实验模型证实[15]。在这些模型中，原发肿瘤切除后，那些快速生长的转移瘤并不是起源于肿瘤细胞的播种，而是起源于早已存在的微小转移灶。“血管生发开关”在原发肿瘤处会倾向血管生成；而继发转移处“血管生发开关”会倾向血管稳定。肿瘤原发灶范围内，稳定因子也会产生，只是没有足够的数量来对抗血管生成。另外，血管稳定因子在循环中可能有更长的半衰期，所以在远离原发肿瘤部位的区域，“血管生发开关”的效应往往相反。原发部位的肿瘤切除后，这些血管稳定因子数量变得相对不足，从而使转移性肿瘤产生的前血管生成因子主导了“血管生发开关”，促进了远处肿瘤新生血管的生成。 3 细胞表面异位F1F0 ATP合酶 在内皮细胞表面，异位F1F0 ATP合酶作为一种受体已被确认存在。Moser等对内皮细胞表面血管抑素粘合位点的鉴定做了大量工作。和其他的纤溶酶原裂解物一样，如纤维蛋白溶酶，血管抑素也由此衍生而成。研究者分别准备了放射性碘标记的血管抑素与纤溶酶原，然后通过细胞黏合测定的方式，证明了血管抑素确实黏附于人类脐静脉上皮母细胞(HUVEC)表面的特殊位点，而且与纤溶酶原有着不同的粘连动力学。另外纤溶酶原和血管抑素并不相互竞争黏附于HUVEC