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抑肝纤及拆方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1,PAI-1蛋白表达影响
抑肝纤及拆方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1,PAI-1蛋白表达影响
作者:陈俊红 王继 孟令权 郭文有
【摘要】 目的探讨抑肝纤及拆方对肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1,PAI-1蛋白表达的影响。方法采用四氯化碳(CCl4)法复制大鼠肝纤维化模型,应用免疫组化方法观察抑肝纤及拆方对肝纤维化模型大鼠肝组织TGF-β1,PAI-1表达的影响。结果各组动物治疗后,肝组织TGF-β1,PAI-1蛋白表达量均有不同程度的降低,其中抑肝纤全方组较其他用药组下降明显。结论中药复方抑肝纤及拆方可有效防治大鼠肝纤维化,尤以抑肝纤全方作用最佳,其作用机制可能是通过抑制肝纤维化组织TGF-β1,PAI-1蛋白的表达实现的。
【关键词】 肝纤维化 中医治法 TGF-β1 PAI-1 免疫组化
Abstract:Objective To investigate the influence of Yiganxian decoction and its separated decoction on the expression of TGF-β1 and PAI-1 protein in liver tissue of hepatic fibrosis in rats . MethodsLiver fibrosis model rats were induced by carbon tetrachloride, the expression and localization of TGF-β1 and PAI-1 in liver tissue were analysed by the method of immunohistochemistry. ResultsAfter treatment with medication, the positive expression of TGF-β1 and PAI-1 protein in liver tissue was decreased at different levels. Yiganxian decoction was better than other groups.ConclusionYiganxian decoction and its separated decoction can effectively prevent and treat the liver fibrosis in rat model. Yiganxian decoction is the most effective. Its mechanism may be related with inhibiting the expression of TGF-β1 and PAI-1 in liver fibrosis tissue.
Key words:Liver fibrosis; Herbal therapy; TGF-β1; PAI-1; Immunohistochemistry
肝纤维化是肝脏对各种因素所致的慢性损伤的一种修复反应,是大多数慢性肝病所共有的病理过程,也是各种慢性肝病向肝硬化过度的中间环节,其特征是细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在肝内过度沉积[1]。
中药复方抑肝纤是王继教授治疗肝病的经验方,我们在前期实验研究中业已证实抑肝纤对肝纤维化有一定抑制、逆转作用[2]。本实验按中医治疗原则进行拆方研究,观察抑肝纤全方及拆方对肝纤维大鼠肝组织TGF-β1,PAI-1蛋白表达的影响,旨在从更深层次上探讨抑肝纤方的抗肝纤维化作用机理及组方规律。
1 材料
1.1 动物
健康雄性Wistar大鼠48只,清洁级,体重(200±20) g,购自河北医科大学动物实验室。
1.2 用药
无菌40%四氯化碳(CCl4)花生油溶液,购自天津化工二厂。抑肝纤全方及拆方药物购于河北医科大学中医学院门诊部,由白求恩国际和平医院药剂科水煎,浓缩制备。抑肝纤全方由黄芪、 白术、丹参、川芎、鳖甲、牡蛎等7味中药组成,煎剂生药含量为3 g/ml,拆方组丹参、川芎煎剂生药含量为0.69 g/ml,黄芪、白术煎剂生药含量为1.38 g/ml, 鳖甲、牡蛎煎剂生药含量为0.7 g/ml。各治疗组大鼠生药用量均按相当于成人口服剂量的10倍计算。
1.3 试剂
转化生长因子β1(TGF-β1)免疫组织化学染色试剂盒:购于北京中山生物技术有限公司;兔抗大鼠血浆酶原激活酶抑制因子-1,羊抗兔IgG购于武汉博士德生物工程有限公司。
1.4 方法
1.4.1 动物分组、模型复制及给药方法
48只大鼠在正式实验前适应性饲养一周后,随机分为6组,每组8只,即正常对照组、
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