抗癫痫药物皮肤不良反应及HLA—B-1502基因相关性探究.doc

抗癫痫药物皮肤不良反应及HLA—B*1502基因相关性探究 抗癫痫药物皮肤不良反应与HLA”B*1502基因的相关性研究 抗癫痫药物（AEDs）如卡马西平（CBZ）、奥卡西平（OXC）、拉莫三嗪（LTG）、苯巴比妥（PB）及苯妥英钠（PHT）均可引起皮肤不良反应，包括轻度斑丘疹（MPE）、Stevens-Johnson综合征（SJS）、中毒性表皮坏死松解症（toxic epidermal necrolysis，TEN）及药物超敏综合征（Drug hypersensitivity syndrome，DHS）。其中SJS和TEN是严重的皮肤和黏膜反应，可导致永久性残疾甚至致命，TEN致死率高达40%[1]。 　目前研究证据最多的引起皮肤不良反应是卡马西平，研究表明，这些严重的皮肤不良反应与HLA基因相关，中国台湾、香港及东南亚国家研究表明CBZ所致SJS与HLA-B*1502基因相关。近年来，中国内陆如广州、武汉等地的亦有研究表明CBZ等芳香族AEDs所致SJS与HLA-B*1502基因有强相关性，目前尚未有人对江西汉族人群做过此项研究。本文拟对46例因服用芳香族AEDs而导致皮肤不良反应的病例作为研究对象，根据皮肤不良反应的轻重分为Stevens-Johnson综合征（SJS）、轻微皮肤反应（MPE）组、对照组（包括耐受者和正常志愿者），采用序列特异性引物聚合酶链反应（SSP-PCR）技术检测HLA-B*1502的基因型，采用Fisher确切概率法检验分析HLA-B*1502与AEDS-cADRs的相关性。以期为临床合理用药提供指导。 　1 资料与方法 　1.1 一般资料 以笔者所在医院2012年7月-2013年12月神经内科门诊及住院部的因服用芳香族抗癫痫药物而导致皮肤不良反应的46例患者作为研究对象，其中研究组32例，包含SJS 13例，MPE 19例；对照组14例（包括耐受者8例和正常志愿者6例）。对照组为服用抗癫痫药物无不良反应患者和无神经系统疾病、无遗传病家族史的健康体检者。 　1.2 实验方法 　1.2.1 仪器与试剂 美国Omega Bio-Tek公司的全血基因组DNA提取试剂盒，美国BIO-RAD公司的DNA Engine PCR仪、凝胶电泳仪及凝胶成像系统。诊断试剂由北京全式金生物技术有限公司提供，引物由美国Invitrogen生命技术公司提供。 　1.2.2 步骤 （1）血标本采集及DNA提取；（2）DNA浓度和纯度测定；（3）引物稀释；（4）PCR反应；（5）琼脂糖凝胶电泳；（6）结果判断。 　1.3 统计学处理 使用SPSS 17.0软件对所得数据进行处理，计数资料采用Fisher确切概率法检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　2 结果 　2.1 电泳结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示SJS组HLA-B*1502阳性率达100%（13/13）。MPEHLA-B*1502阳性率为10.5%（2/19）。对照组HLA-B*1502阳性率为7.1%（1/14），详见图1～8。 　SJS组1～13号、MPE组14～32号、对照组33～46号。C1、C2、S1、S2、S3和S4的目的条带大小分别为796bp、256bp、1331bp、125bp、572bp、373bp。特异性引物S1、S2、S3和S4全部扩增出目的条带者为HLA-B*1502阳性，若有一对或几对引物无目的条带则为阴性）。 　2.2 各样本组HLA-B*1502基因频率分析 SJS组阳性13例（100%），阴性0例；MPE组阳性2例（10.5%），阴性17例（89.5%）；对照组阳性1例（7.1%），阴性13例（92.9%）。SJS组与MPE组阳性率比较，差异有统计学意义（Plt;0.05）；SJS组与对照组阳性率比较，差异有统计学意义（Plt;0.05）；对照组与MPE组阳性率比较，差异无统计学意义。 　3 讨论 　抗癫痫药物是神经内科常用药物，而由此引发的不良反应最常见的为皮肤不良反应，包括轻度斑丘疹（maculopapular eruptions， MPE）以及致命性的皮肤不良反应（（severe cutaneous reactions， SCR）如Stevens-Johnson综合征（SJS）、中毒性表皮坏死松解症（toxic epidermal necrolysis， TEN）及药物超敏综合征（Drug hypersensitivity syndrome， DHS）。SJS和TEN均是严重威胁生命的SCR，病变累及皮肤面积少于10%为SJS，而大于30%为TEN，在10%～30%之间的为SJS与TEN共存[2]。　　 SJS/TEN的发病机制目前还不完全清楚，多数研究认为由免疫反应引起，也有学者[4]在易感基因方