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杜仲多糖对环磷酰胺致小鼠毒性影响 　 作者：辛晓明　郭桂丽　王浩　陈美华　朱玉云　高允生 【摘要】 目的研究杜仲多糖（Eucommia polysaccharide, EOP）对环磷酰胺（Cyclophosphamide, CY）致毒性的保护作用，为杜仲的进一步开发和利用提供理论依据。方法用CY造模。将实验小鼠平均分为6组，每组12只，生理盐水为阴性对照，Vc为阳性对照，EOP分别用高、中、低不同的剂量组灌胃给药，除空白组以外均腹腔注射CY，空白组注射生理盐水。连续注射和灌胃5 d，每天称量小鼠体重。末次给药禁食不禁水12 h后将小鼠眼球取血测MDA，SOD，然后将小鼠处死取胸腺、脾脏和肝脏分别计算其指数，另外取肝脏做成匀浆测GSH，GPT，左大腿股骨测其骨髓DNA含量。由以上指标分析EOP对CY致毒性的保护作用。结果EOP能有效地保护CY所引起的小鼠毒性作用，相对于模型组，EOP组的体重下降减少，胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数都有所升高；MDA降低，SOD升高，GSH升高，GPT升高；血象测定白细胞、红细胞、血小板均有所升高；骨髓DNA含量升高；其中高剂量组最明显。结论EOP对CY引起的毒性作用有一定的保护作用。 【关键词】 杜仲多糖；环磷酰胺；致毒性 　　近几十年来，人们发现从植物中提取的多糖具有非常重要与特殊的生理活性。这些多糖参与了生物体中细胞的各种活动，具有抗肿瘤和免疫促进、抗炎、抗病毒、抗凝血、降血糖、降血脂、抗疲劳、抗衰老等作用［1］。据报道，已有近百种植物的多糖被分离提取出来。这类多糖来源广泛且细胞毒性较低，应用于生物体毒副作用小，因此对植物多糖的研究已成为医药界的热门领域［2］。杜仲多糖（Eucommia polysaccharide, EOP）是从杜仲科植物杜仲（Eucommia ulmoides Oliv，EUO）的干燥树皮中提取出的水溶性糖性成分，是近年来发现的杜仲又一活性成分。本实验结合EOP的医学药理作用的研究现状，初步探讨其对环磷酰胺（Cyclophosphamide, CY）的在骨髓抑制、肝功能损害等毒副作用的保护作用。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物 　　昆明种清洁级小鼠，18～22 g，♂♀各半，由泰山医学院动物实验中心提供，实验前试养3 d。 　　1.2 材料 　　EOP由水提醇沉法提取，硫酸-苯酚测其含量为55.34％；注射用CY，批江苏恒瑞医药股份有限公司产品；维生素C注射液，山东鲁抗辰欣药业有限公司产品，批号050901； MDA，SOD，GSH，GPT试剂盒，南京建成生物工程研究所提供。 　　1.3 仪器 　　Spectrumlab54紫外见分光光度计，上海棱光技术有限公司产品； LXJ-IIB型低速大容量离心机，上海安亨科学仪器厂产品；血象仪，KX-21型Sysmex公司生产。 　　2 方法 　　2.1 动物及分组 　　取小鼠72只，雌雄各半，随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、EOP高剂量组（200 mg·kg-1）、EOP中剂量组(100 mg·kg-1)、EOP低剂量组(50 mg·kg-1)。除空白对照组外，其余各组均腹腔注射CY溶液（40 mg·kg-1），空白对照组腹腔注射等量生理盐水。注射的同时，阳性对照组、EOP组分别灌胃维生素C、不同剂量的EOP溶液，均为0.2 ml·（10g）-1，而空白对照组及模型组均灌胃等量生理盐水。注射及灌胃连续5 d，每天称量小鼠体重。末次给药禁食不禁水12 h后将小鼠眼球取血测MDA、SOD，然后将小鼠处死取胸腺、脾脏和肝脏分别计算其指数，另外取肝脏做成匀浆测GSH、GPT，左大腿股骨测其骨髓DNA含量［3］。 　　　2.2 统计分析 　　实验数据用±s表示，采用SPSS 13．0统计软件包进行数据处理，组内数据间的比较采用单因素方差分析，组间比较采用t检验。 　　3 结果 　　3.1 体重变化 　　见表1。表1 EOP对CY致损伤小鼠体重变化的影响（略） 　　3.2 血象的测定结果 　　见表2。表2 EOP对CY致损伤小鼠血象变化的影响（略） 　　3.3 骨髓DNA含量、肝组织GPT的测定结果 　　见表3。表3 EOP对CY致损伤小鼠骨髓DNA变化的影响（略） 　　3.4 胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数 　　见表4。表4 EOP对CY致损伤小鼠各脏器指数变化的影响（略） 　　3.5 MDA，SOD，GSH试剂盒测定结果 　　见表5。表5 生化指标测定结果（略） 　　4 讨论 CY是一种强免疫抑制剂［4］，是临床上常用的广谱抗肿瘤药物。较常见的不良反应为骨髓抑制、骨肠道反应、肝功能损害、胚胎及骨骼发育毒性等，但其具体的病理机制尚未完全阐明，其中氧化∕抗氧化失衡、自由基损伤是目前已知的重要机制。本实验结