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替尼泊甙对胃癌细胞凋亡及细胞周期影响 　【摘要】 目的探讨替尼泊甙体外对胃癌细胞BGC823的作用机制。方法体外培养胃癌细胞株BGC823，通过MTT法，流式细胞仪，观察替尼泊甙对胃癌细胞的生长抑制作用以及对细胞凋亡，细胞周期的影响。结果在一定浓度范围内，细胞的生长抑制率随着浓度的增加而增加，细胞的凋亡率随着时间的增加而增加，细胞周期被阻滞在G2/M期，在48小时达到高峰。结论替尼泊甙可抑制胃癌细胞的生长，诱导细胞的凋亡，其诱导凋亡的能力可能是通过把细胞阻滞在G2/M期实现的。 【关键词】 替尼泊甙；胃癌；凋亡；细胞周期 基金项目：河南省科技攻关资助项目(0424410087) 　　Effects of Teniposide on Cell Cycle Phase and Apoptosis of Gastric Carcinoma Cell Lines 　　Abstract：Objective To identify the action mechanism of teniposide on gastric carcinoma cell line BGC823. MethodsThe suppressive rate of cell growth of teniposide was examined by MTT assay, the development of cell cycle and apoptosis induced by teniposide was examined by flow cytometry.ResultsMTT assay showed that various concentration of VM26 could effetely inhibit the growth cell; according to the results of flow cytometry, some typical sub diploid peaks were observed,the distribution of cell cycle phase changed at various time, the cell cycle of G2/M phase was arrested within 48 hours. ConclusionVM26 could significantly inhibit the growth and proliferation of gastric carcinoma cell lines in vitro. Apoptosis induced by VM26 was the major mechanisms of VM26. The influence of the distribution of cell cycle phase was associated with apoptosis. 　　Key words：Teniposide; Gastric carcinoma; Apoptosis; Cell cycle phase 　　0引言 　　基础研究表明，替尼泊甙（VM26）对细胞DNA的作用是同类药物依托泊甙（VP16）的8~10倍，但VM26在消化系统肿瘤的治疗上应用较少，本实验通过多种实验方法，观察了VM26对胃癌细胞的体外抗瘤活性和诱导细胞凋亡的能力，探讨其在胃肠肿瘤上应用价值。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　1．1.1细胞株人胃癌细胞BGC823，河南省医学研究所惠赠。 　　1．1.2药物及试剂替尼泊甙为美国百时美施贵宝公司产品（批号：6G14423），1640 培养基（GIBCO公司产品），标准胎牛血清（天津TBD血液研究所产品），鼠抗人p53单克隆抗体(迈新试剂公司)， 即用型SP免疫组化试剂盒和浓缩型DAB显色试剂盒为美国Sigma公司产品。 　　1.2方法 　　1.2．1细胞形态学观察倒置显微镜下观察不同时间段的细胞生长情况。并取不同时间段的细胞涂片固定，免疫组化染色，观察细胞凋亡相关蛋白p53表达变化。 　　1.2．2MTT法测定不同浓度下细胞生长抑制率的变化取对数生长期的细胞，接种于96孔板，孵育48h后，酶联免疫检测仪在570nm波长测每孔的吸光值（OD）、按下列公式计算细胞生长抑制率：细胞生长抑制率（%）=（1实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%。每组重复5次。 　　1.2．3细胞凋亡率和细胞周期检测本次仅选较小的药物浓度组作流式细胞仪检测，每浓度取4个时间段，即药物作用后0、12、24、48h。按实验设计处理细胞，处理完毕后，用70%的冷乙醇固定。采用碘化丙锭（PI）一步插入性DNA定量荧光染色法，检测细胞