桔梗提取物中桔梗皂苷D反相高效液相色谱检测方法探究.docVIP

桔梗提取物中桔梗皂苷D反相高效液相色谱检测方法探究 　 作者：梁娟 潘见 谢慧明 高香兰 【摘要】 目的建立桔梗提取物中桔梗皂苷D的高效液相色谱（HPLC）检测方法。方法采用RP－HPLC法、蒸发光散射检测器（ELSD）测定桔梗皂苷D含量。色谱柱为Agilent ODS（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈∶0.5％乙酸溶液＝28∶72，流速1.0 ml/min；检测器为Waters ELSD 2420。结果桔梗皂苷D在0.015 625～0.25 mg/ml范围内与峰面积具有良好的线性关系，r=0.999 6。桔梗皂苷D平均回收率为98.25％，RSD为1.18％。结论通过6批不同的桔梗提取物的含量测定，证明该方法简便、准确、可靠。 【关键词】 桔梗提取物； 桔梗皂苷D； 反相高效液相色谱法； 蒸发光散射检测 　　Abstract：ObjectiveTo establish an RP-HPLC determination method of the platycodin D in Platycodon Grandiflorum extracts. MethodsPlatycodin D content was detected by high performance liquid chromatogram-ELS Detector（HPLC－ELSD）. Agilent Hypersil ODS (4.6 mm×250 mm，5 μm) was used , mobile phase was V (acetonitrile)∶V (0.5％acetic acid)=28∶72 at 1.0 ml/ min speed. ELSD2420 detector was used for qualitative and quantitative analysis in external standard method.ResultsPlatycodin D has good linear relation in 0.015625 mg/ml－0.25 mg/ml. r=0.9996. The recovery of platycodin D was 98.25%, RSD was 1.18%. ConclusionThe content of platycodin D in six different groups of samples is determined. The obtained results indicate that this method is simple, accurate, and credible. 　　Key words：Platycodon grandiflorum extracts； Platycodin D； HPLC-ELSD； Analytic method 　　在我国，以中药材为原料的中药提取物被用于医疗或保健食品已形成了一定的生产规模。规范中药提取物的质量对中药产业的发展至关重要，大量中药提取物还有待制订国家标准或行业标准［1］。桔梗提取物具有多种生物活性和很好的药用价值［2］，是市场畅销的中药提取物之一，但现无严格的质量标准。桔梗总皂苷是桔梗提取物的主要药效成分，其中桔梗皂苷D含量最高，药效较确定［3］。2005年版《中国药典》中桔梗药材是以总皂苷为指标，采用重量法测定总皂苷含量［4］，精确性较低。许传莲等［5～7］用高效液相色谱紫外检测器检测桔梗药材中桔梗皂苷D，但桔梗皂苷D 无共轭结构,无强的发色基团,末端吸收检测干扰较大。目前尚没有报道检测桔梗提取物中桔梗皂苷D的相关文献。本文以桔梗皂苷D为指标，采用HPLC-ELSD为检测方法，对桔梗提取物中的桔梗皂苷D进行了分析研究。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器：Waters高效液相色谱仪［Waters515高压泵，Waters2420蒸发光散射检测器（ELSD），Empower数据处理系统］，SIGMA 3K15型离心机，Mettler Toledo AG135型电子天平，SC5202型超声波清洗器。 　　1.2 试药桔梗药材由亳州济人药业有限公司提供。桔梗提取物由本中心按拟议中的标准生产工艺制备。桔梗皂苷D对照品购于吉林农业大学药学院。乙腈为色谱级，水为重蒸水。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件色谱柱为Agilent Hypersil ODS柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈∶0.5％乙酸＝28∶72，柱温为25℃，流速1.0 ml/min。ELSD参数：雾化器温度36℃，漂移管温度75℃，载气压力25psi。理论塔板数按桔梗皂苷D峰计算应不低于3000，桔梗皂苷D的峰与其他峰