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槐定碱有关物质薄层色谱法探究 　 作者：张爱华， 陈新菊， 吴联奎 【摘要】 　　目的建立薄层色谱法检查槐定碱中有关物质的方法。方法采用碱性硅胶G薄层板，苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）为展开剂，依次喷稀碘化铋钾试液和30%的硫酸乙醇溶液显色。结果主成分与其他生物碱、降解产物的斑点能得到较好的分离。结论该法可用于槐定碱提取工艺、原料和制剂的质量监控。 【关键词】 槐定碱 有关物质 薄层色谱法 　　Abstract：ObjectiveTo establish the method of Thin-Layer Chromatography for sophoridine and its impurities. MethodsLamella of basic silica gel G was adopted. The spread solvent was made of Benzene-Acetone-Methanol (8∶3∶0.5) (They are saturated by ammonia steam). Color display was made by spraying sparse Potassium Bismuth Iodide and followed by spraying 30% sulfuric acid ethanol. ResultsSophordine and its impurities (such as unrelated alkaloid, degradation product) could be separated .Conclusion The method can be used for the quality control of material , preparation and sophoridine extraction process. 　　Key words：Sophoridine； Impurity； Thin-Layer Chromatography 　　槐定碱（sophoridine）是一种具有新型结构的抗肿瘤新药，是从豆科槐属植物苦豆子Sophora alopecuroides L.的成熟种子中提取的生物碱。在对新药槐定碱定性定量分析的系统性研究中，曾采用薄层色谱法检查槐定碱中的有关物质，取得了满意的结果。有报道［1］从苦豆子中分得生物碱成分有20种之多，其中主要生物碱是槐定碱、槐果碱、苦参碱等，它们大都含有相似的基本骨架，属于喹喏里西啶（Quiolizidine）类生物碱，也常被称为苦参碱类生物碱，对这类生物碱的薄层色谱分析，国内曾有一些文献报道［2，3］，笔者在有关参考文献的基础上，除比较了不同的吸附剂、展开剂外，主要在显色剂的应用上有一点改进，即增加了通用显色剂30%硫酸乙醇溶液的使用，使槐定碱的薄层色谱中其它杂质均能显现，提高了方法的灵敏度。本法不仅可作为槐定碱提取工艺、原料和制剂的质量监控手段，也可为其他生物碱的薄层色谱分析提供参考。 　　1 药品与试剂 　　硅胶G（青岛海洋化工厂）；其余试剂为分析纯。 　　苦参碱对照品(0805-9703)、氧化苦参碱对照品(0780-9703)由中国药品生物制品检定所提供；槐定碱、槐果碱纯品由江西中医学院吴运光教授提供。槐定碱原料由江西中医学院提供。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试品溶液的制备分别取槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱纯品各适量，用三氯甲烷制成2 mg·ml-1的溶液；量取上述各溶液1 ml，混匀即得混合溶液；另取槐定碱适量，置105℃加热破坏3 h，用三氯甲烷制成2 mg·ml-1的溶液。 　　2.2 薄层色谱条件碱性硅胶G（取硅胶G 2 g，加0.4%的氢氧化钠6 ml制成）薄层板，厚度0.2～0.3 mm；展开剂：苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）（氨蒸气饱和）上行展开15 cm；显色剂：依次喷稀碘化铋钾试液和30%的硫酸乙醇溶液。 　　　2.3 薄层分离实验取上述供试品溶液各10 μl，按上述薄层色谱条件试验，结果显示，主成分与其他生物碱、降解产物的斑点能得到较好的分离。见图1。 　　2.4 最低检测量实验在上述薄层色谱条件下测得槐定碱、苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱的最小检出量分别为0.2，0.5，0.2，0.5μg。 　　2.5 有关物质的限量检查方法取本品，加三氯甲烷制成每毫升中含10 mg的溶液，作为供试品溶液，精密量取适量，加三氯甲烷制成每毫升中含0.2 mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一碱性硅胶G薄层板上，用苯-丙酮-甲醇（8∶3∶0.5）为展开剂，置氨蒸气饱和的环境中展开，展开后，晾干，依次喷稀碘化铋钾试液和30%的硫酸乙醇溶液，使