抗除草剂转基因玉米育种筛选方法的建立.pdfVIP

分子植物育种，2008年，第6卷，第1期，第155-160页 MolecularPlantBreeding,2008,Vol.6,No.1,155-160 新思路、新技术、新方法 NovelThinkingTechnology 抗除草剂转基因玉米育种筛选方法的建立 2 1 1 2 1 1 1* 武淑香 姜志磊 孔祥梅 殷奎德 袁英 李晓辉 刘德璞 1吉林省农业科学院生物技术研究中心,长春,130124;2黑龙江八一农垦大学,大庆,163319 *通讯作者,liudp@ 摘 要 本试验建立了一个以除草剂抗性为选择标记的玉米( L.)转基因育种中的早期世代批量快速 Zeamays 筛选技术。通过对玉米自交系铁7922、吉8902、丹340、PA91以及转 基因PA91玉米PA91TBA523在营 Bar 养钵中浸灌250mg/L、500mg/L、1000mg/L、1500mg/L不同浓度的Basta除草剂的萌发试验，确立了不能正 常生长的临界浓度：铁7922在250mg/L的除草剂中无法生长，吉8902在500mg/L的除草剂中无法生长；转 基因材料PA91TBA523在除草剂达到1500mg/L仍与不浸灌除草剂的对照无明显差异。利用此方法对花粉 管通道法转化获得的转基因T植株的种子进行鉴定和筛选，从T植株种子(T)获得阳性植株6株，3株获得 0 0 1 种子，对获得的种子(T)再做除草剂筛选，抗性植株PCR检测均表现阳性。对以往的转基因T做批量规模筛 2 3 选，可以淘汰大量(70%)非转基因和表达不强的株系或个体，减少了田间种植工作量，提高了育种效率。 关键词 玉米转基因,除草剂,筛选 BuildinganApproachforScreeningTransgenicHerbicide-ResistantMaizein BreedingProgram 2 1 1 2 1 1 1* WuShuxiang JiangZhilei KongXiangmei YinKuide YuanYing LiXiaohui LiuDepu 1CenterofAgri-Biotechnology,JilinAcademyofAgriculturalSciences,Changchun,130124;2CollegeofAgronomy,HelongjiangAugustFirstLand ReclamationUniversity,Daqing,163319 *Correspondingauthor,liudp@ Abstract Inpresentpaperwedevelopedaquicklybatchscreeningtechniquebyusingtheherbicide-resistantse- lectionmarkerinearlygenerationoftransgenicmaize ( L.).Weestablishedthecriticalconcentrationof Zeamays maizestuntinggrowththatmightbeasfollows,InbreedlineTie7922couldnotgrowwellin250mg/L,Ji8902in 500mg/L,PA91TBA523,herbicide-resistanttransgenicmaizein1500mg/L,bytheexperimentsofimmersing seedsoftheinbreedlines (Tie7922,Ji8902,Dan340,PA91)andstabi