漏芦对梗阻性黄疸大鼠肝损伤形态学探究.docVIP

漏芦对梗阻性黄疸大鼠肝损伤形态学探究 　【关键词】 漏芦 摘要：目的探讨漏芦Rhaponticum uniflorm（L.DC.，RU）对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学变化。 方法 96只大鼠随机分成4组：胆总管结扎（CBDL）组、胆总管结扎加用腹腔注射漏芦（RU）组、手术对照（sham）组、正常对照（NC）组。采用胆总管结扎术制作大鼠梗阻性黄疸模型，腹腔注射RU，各组大鼠分别在术后3，7，14，21 d处死，观察肝脏光镜、电镜的形态学变化。结果术后3 d肝脏损伤开始变化，7，14 d严重，21 d肝细胞明显出现再生现象，与CBDL组比较，CBDL-RU 组变化较轻。结论RU对梗阻性黄疸大鼠肝损伤的形态学有一定的改善作用。 关键词：漏芦； 肝损伤； 梗阻性黄疸 毕业论文 梗阻性黄疸对机体的损伤是十分重要的复杂的课题，其病变可累及肝、肾、心等多个脏器组织，可造成肝、肾等多个器官功能衰竭。既往 研究 发现，漏芦具有良好的抗氧化、抗衰老作用，同时还具有保护生物膜，改善微循环，增强纤维系统活性的作用［1］。本实验探讨漏芦（RU）对梗阻性黄疸肝损伤的保护作用，为临床 治疗 梗阻性黄疸肝损伤提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 材料漏芦采自吉林省长白山，经延边大学药学院刘永镇教授鉴定为真品。漏芦切碎后，用90%乙醇回流提取（1 h）3次，温度100℃，合并3次滤液，减压浓缩，得漏芦乙醇提取物（1 g漏芦有效成分相当于7.3 g漏芦生药），其他试剂均为国产 分析 纯。JENM-1200型 电子 显示镜，倒置显微镜。Wistar大鼠，雌雄各半，体重约180～200 g，由吉林大学白求恩医学部实验动物部提供。 1.2 方法取健康Wistar大鼠96只，雌雄各半，体重约180～200 g，随机分成4组，每组24只。（1）胆总管结扎组（CBDL组）：24只，术前禁食12h，采用氯胺酮麻醉，无菌操作下行上腹正中切口长约1.5cm，充分显露胆总管，用7/0丝线双重结扎胆总管，1/0丝线双层连续缝合腹壁切口。麻醉清醒6h后自由进食、饮水。（2）胆总管结扎加用腹腔注射漏芦组（CBDL-RU组）：手术操作同CBDL组，于术后第1天起，每天RU按0.1 g/Kg剂量腹腔注射1次。（3）手术对照组（sham组）：术中充分显露胆总管后，肝门区游离胰腺前段胆总管而不予结扎。围手术期处理同CBDL组。（4）正常对照组（NC组）：无手术及麻醉操作。CBDL组、CBDL-RU组、NC组及sham组又根据胆总管结扎术后时间的不同分为术后3，7，14，21 d组，每组6只。实验过程CBDL组手术后7d 死亡1只，CBDL-RU组手术后20 d时死亡1只。以上各组大鼠分别在术后3，7，14，21d 处死，取出肝脏，40%甲醛溶液固定24 h，石蜡包埋做成4～5 mm的切片，常规HE染色；切取肝脏2 mm×1 mm×1 mm大小规则组织块，迅速置于2% 戊二醛溶液固定24 h，常规电镜包埋、选材、超薄切片常规锇酸染色。 　 2 结果 2.1 HE染色NC，Sham组肝索肝细胞排列规整，肝细胞无肿胀，肝小叶结构正常，无胆管增生，无瘀胆及淋巴细胞浸润，核仁清晰，无染色质边聚。CBDL组与CBDL-RU组：（1）CBDL组术后3 d，肝索排列尚规整，肝小叶结构正常，肝窦及肝细胞中可见少量褐色胆汁栓；CBDL-RU组肝索排列更规整。（2）CBDL组术后7 d，肝细胞排列欠规则肝索迂曲加重，肝窦内仍可见少量胆汁栓；CBDL-RU组与CBDL组改变相似，但可见核仁清晰，并可见多个核仁，有肝细胞增生现象。（3）CBDL组术后14 d，肝窦扩张，部分肝小叶正常结构丧失，肝索排列紊乱，肝细胞肿胀，核染色加深，染色质聚集成碎块，部分染色质边集；CBDL-RU组肝细胞肿胀轻，肝素迂曲较轻，肝小叶结构破坏较少，且肝窦内仅见少量胆汁栓，无明显的核边聚现象。（4）CBDL组术后21 d，肝细胞水肿重，部分肝细胞瘀胆，颗粒变性，嗜酸性变性，并见有肝细胞再生现象，假小叶形成。肝索紊乱明显，沤管区小叶间胆管增生扩张，纤维组织增生明显，胆管排列紊乱，可见瘀胆，并见淋巴细胞浸润；CBDL-RU组肝细胞变性较轻，肝小叶正常结构部分破坏，小叶周边及汇管区纤维组织增生较轻，肝索紊乱较CBDL组轻，也可见肝细胞再生现象。 毕业论文 2.2 超微结构观察NC 、Sham组肝细胞核可见核仁，染色质分布正常，胞质见较多线粒体，丰富粗面内质网及糖原颗粒，胆小管两端紧密连接，内见微绒毛。CBDL组与CBDL-RU组：（1）CBDL组术后3 d，肝细胞核轻度固缩、线粒体嵴断裂、糖元颗粒略减少，内质网稍减少，核增大，核内染色质略增多，Kupffer胞质内溶酶体增多，肝细胞溶酶体增多