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番石榴叶总黄酮提取工艺探究 　【摘要】 　　目的为充分利用番石榴叶资源，优选番石榴叶总黄酮的最佳提取工艺。方法以总黄酮含量为考察指标，采用正交设计的方法研究提取番石榴叶总黄酮的工艺条件。结果影响番石榴叶总黄酮提取效果的主次因素为：乙醇浓度gt;回流时间gt;提取次数gt;溶剂用量。结论番石榴叶总黄酮最佳提取工艺为10倍量70%乙醇加热回流提取两次，2h/次。 【关键词】 番石榴叶； 总黄酮； 正交设计 　　Abstract：ObjectiveTo study an extraction technology for total flavones from leaves of Psidium guajava L. MethodsThe extraction conditions of total flavones were studied through measuring the content of the total flavones extracted.ResultsThe factors which influenced the extraction rate were sorted as follows: A gt; D gt; C gt; B, where A , B, C, D stood for the concentration of ethanol, the dosage of ethanol, extraction times and heated times . ConclusionThe optimum process of the extraction technology which obtained through orthogonal design is: 70% ethanol, ten-fold solvent, two times extraction, two hours each time. 　　Key words：Psidium guajava Leaves; Total l flavones; Orthogonal design 　　番石榴叶为桃金娘科植物番石榴Psidium guajava L.的干燥叶及带叶嫩茎，分布于华南各地至四川西南部，含β-谷甾醇、榭皮素、番石榴苷、无色车菊素、番石榴酸等成分［1］。现代药理研究表明，番石榴叶提取出的总黄酮苷及单黄酮苷具有降血糖的作用［2］；近年来对黄酮类化合物的药理作用研究较多，发现其具有抗心脑血管病、抗氧化、镇痛、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等作用［3，4］。为了进一步研究番石榴叶总黄酮的功效，充分开发我国丰富的番石榴叶植物资源, 我们以总黄酮含量为考察指标，对番石榴叶总黄酮提取工艺进行了研究。 　　1 材料与仪器 　　1.1 仪器722N型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；SHBⅢ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；ZFQ85A旋转蒸发仪(上海医械专机厂)；AL204电子天平（METTLER TOLEDO），HWS-20恒温水浴箱（江苏太仓市实验设备厂）。 　　1.2 试剂芦丁对照品（中国药品生物制品检定所)；番石榴叶（购自广西药材站)， 95%乙醇；亚硝酸钠；硝酸铝；氢氧化钠等皆为市售分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 番石榴叶总黄酮的提取取干番石榴叶，粉碎，准确称取50g，置于1000ml圆底烧瓶中，按要求加入一定量的提取剂，加热回流提取一定时间，滤过，滤液减压回收溶剂，真空干燥，称重，得待测番石榴叶干膏。 　　2.2 总黄酮含量测定方法 　　2.2.1 测定波长的确定精密称取干燥芦丁对照品20 mg，置100 ml容量瓶中，60%乙醇溶解，定容，得标准对照液（含无水芦丁0.200 0g/L）。精密移取芦丁对照液2.0 ml置25 ml容量瓶中，加入50g/L亚硝酸钠溶液0.75 ml，摇匀，静置6 min；再加100g/L硝酸铝溶液0.75 ml，摇匀，静置6 min；再加40 g/L氢氧化钠溶液10 ml，60%乙醇稀释至刻度,摇匀，静置10min，以60%乙醇调零，从200 nm至600 nm进行全波长扫描，测得500 nm处有最大吸收，因此以500 nm为测定波长。 　　2.2.2 标准曲线绘制分别精密移取芦丁标准对照液0，1.5，2.5，3.5，4.5，5.5ml置25ml容量瓶中，按“2.2.1”项下“加入50 g/L亚硝酸钠溶液”起操作，以第一瓶溶液为空白调零，于500 nm测各瓶溶液吸光度；以浓度（ C ）和吸光度（ A ）进行线性回归，得方程为：A = 9.975 4C - 0.003 5；r= 0.998 9。 　　2.2.3 精密度实验精密吸取芦丁对照液2.0 ml置25ml容量瓶中