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益母草镇痛抗炎作用实验探究
益母草镇痛抗炎作用实验探究
作者:王丽娟 张丽 王勇 王健
【摘要】 摘要:目的研究益母草的镇痛、抗炎作用。方法以阿司匹林为阳性对照,采用小鼠热板法和化学刺激法观察益母草的镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型观察益母草的抗炎作用。结果益母草(60g和90 g生药·kg-1,ig)及阿司匹林均能延长小鼠对热刺激疼痛反应潜伏期,使小鼠10,20min内扭体次数减少,并明显减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀和角叉菜致大鼠足跖肿胀,与生理盐水组比较有显著性差异(Plt;0.05),镇痛及抗炎作用强度与阿司匹林相近或稍弱。结论益母草具有明显的镇痛抗炎作用。
【关键词】 益母草 镇痛作用 抗炎作用
益母草为唇形科植物益母草Leonorus heterophyllas的全草。主要含有益母草碱、水苏碱等多种生物碱,具有活血祛淤、调经及利水消肿之功效,为妇科经产要药,主要具有兴奋子宫、改善血流动力学、保护缺血心肌、抗血栓形成、利尿及防治急性肾小管坏死等药理作用[1]。本实验应用热板法和扭体法以及急性炎症模型观察了益母草对疼痛和炎症的影响。
1 材料与仪器
1.1 动物 昆明种小鼠,雌雄兼有,体重17~23 g,;Wistar 大鼠,雄性,体重 150~180 g。购自天津药物研究院,合格证号为:津实动准第02号。
1.2 药品和试剂 益母草,河北祁新中药颗粒饮片有限公司生产,批号 0612301;乙酰水杨酸,天津石英钟厂霸州市化工分厂生产,批号无水乙醇,天津市华东试剂厂生产,批号乙醚,天津市北联精细化学品开发有限公司生产,批号Trypan blue,美国SIGMA公司生产,批号0210S04;100%二甲苯,天津市化学试剂二厂生产,批号960725;角叉菜胶,广州市凯星食品工业有限公司生产,批
1.3 仪器TD2001 电子天平,天津市天马仪器厂生产;DGG-101-3 电热鼓风干燥箱,天津市天宇实验仪器有限公司生产;游标卡尺,上海量具刃具厂生产,量程:0~150 mm,精密度0.02 mm;AUY120 电子分析天平,日本岛津公司生产。
2 方法
2.1 益母草有效成分的提取[2]取益母草药材,干燥后加水煎煮两次,分别为12倍量水和8倍量水各煎1.5 h,合并滤液,浓缩至4.5 g(生药)·ml-1备用。
2.2 热板法测定益母草的镇痛作用[3] 取筛选合格的雌性小鼠40只,随机分为4组,即生理盐水组、阿司匹林组(0.2 g·kg-1·d-1)、益母草低剂量组(60 g生药·kg-1·d-1)和益母草高剂量组(90 g生药·kg-1·d-1)。各组动物灌胃给药,1次/d,灌胃量为 20 ml·kg-1,连续7 d。分别于给药后第3天,5天 和7天灌胃后1 h,4 h 测定各鼠疼痛反应潜伏期(痛阈值)。如果小鼠在60 s 仍无反应,即将小鼠取出,痛阈值按60 s计算。
2.3 扭体法测定益母草的镇痛作用[3]小鼠雄性40只,雌性20只,分组及给药方法同“2.2”。在末次给药30 min后,各鼠腹腔注射0.6﹪醋酸溶液0.2 ml,观察并记录10 min内,20 min内小鼠扭体反应的次数,计算疼痛抑制率。疼痛抑制率(﹪)= [1-(实验组扭体次数/对照组扭体次数)]×100﹪
2.4 二甲苯致小鼠耳廓肿胀法观察益母草的抗炎作用[3]小鼠52只,雌雄兼用,分组及给药方法同“2.2”。在末次给药60 min后,逐一用乙醚麻醉后,将二甲苯均匀涂在小鼠右耳的前后两面,每只鼠0.02 ml。3.5 h后,尾静脉注射台朌蓝,观察小鼠耳廓颜色的变化。致炎4 h后将小鼠处死,剪下左右两耳,用打孔器(9 mm)分别在两耳同一部位打下圆形耳片,再用分析天平称取耳片的质量,计算各组小鼠的耳片肿胀程度。耳片肿胀程度 = 致炎侧耳片质量(右耳)- 对照侧耳片质量(左耳)。
2.5 益母草对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响[3] 雄性大鼠27只,随机分为3组,即生理盐水组、阿司匹林(0.14 g·kg-1·d-1)组和益母草(60 g生药·kg-1·d-1)组。各组动物每天灌胃给药两次,灌胃量为 15 ml·kg-1,连续7 d。于末次给药1 h后分别给每只大鼠左后足跖皮下注射0.5﹪角叉菜胶溶液0.1 ml,于致炎后5 min,30 min,1 h,2 h,4 h和6 h分别观察并测量每只大鼠两后肢踝周长及足跖厚度,分别计算踝和足跖的相对肿胀度及肿胀抑制率,经t检验比较组间差异的显著性。踝相对肿胀度=(左踝周长-右踝周长)/右踝周长;足跖相对肿胀度=(左足跖厚度-右足跖厚度)/右足跖厚度;踝肿胀抑制率(﹪)=〔(1-给药组踝相对
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