石榴皮中乌索酸及齐墩果酸含量反相高效液相色谱测定.docVIP

石榴皮中乌索酸及齐墩果酸含量反相高效液相色谱测定 　【摘要】 　　目的建立反相高效液相色谱法同时测定石榴皮中乌索酸和齐墩果酸的含量，并进行方法学考察。方法色谱柱为Kromasil C18分析柱 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)，流动相为甲醇-水-磷酸(88∶12∶0.1)，流速0.8 ml·min-1，光电二极管阵列检测器（PAD），检测波长210 nm，柱温28 ℃。结果在选定色谱条件下线性范围良好，乌索酸和齐墩果酸的样品加样回收率分别为99.3%和98.5 %，RSD为2.20%和1.78%。结论方法测定快速，结果准确、可靠，可用于石榴皮中乌索酸和齐墩果酸含量的定量分析。 【关键词】 石榴皮 高效液相色谱法 乌索酸 齐墩果酸 光电二极管阵列检测器 　　Abstract:ObjectiveTo develop a quantitative method for simultaneous determination of ursolic acid and oleanolic acid in Cortex Granati by RP-HPLC.MethodsHPLC with photodiode array detector (PAD) was carried out on Kromasil C18 column (4.6 mm×250 mm, 5 μm) at 28℃ using methanol-water- phosphoric acid (88∶12∶0.1) as mobile phase with a flow rate of 0.8 ml·min-1 and detected wavelength was at 210 nm.ResultsThe good linear relationship was obtained under the optimum conditions. The recoveries of the standards added for ursolic acid and oleanolic acid were 99.3% and 98.5%, respectively, while the relative standard deviations was 2.20 % and 1.78%. ConclusionThe method is rapid and precise.It can be used to determine the ursolic acid and oleanolic acid in Cortex Granati. 　　Key words:Cortex Granati; HPLC; Ursolic acid; Oleanolic acid ; Photodiode array detector 　　石榴皮是石榴科植物石榴Punica granatum L.的干燥果皮，味酸、涩，性温，具有涩肠止泻、止血、驱虫之功效，可用于久泻、久痢、便血、虫积腹痛等的治疗，为历版《中国药典》所收录，含量测定项以鞣质为定量标准［1］。石榴皮含多种化学成分，如没食子酸、石榴皮亭A、石榴皮亭B、鞣云实精、鞣花酸、安石榴林等［2］。安明等［3］研究了石榴中乌索酸的最佳提取工艺条件，并按《中国药典》1995年版Ⅰ部山茱萸项下方法测定了石榴中乌索酸的含量，但石榴皮中乌索酸和齐墩果酸的成分鉴定研究和含量测定均未见文献报道。本实验采用反相高效液相色谱法同时测定了石榴皮中乌索酸和齐墩果酸的含量，并进行了定性鉴别，为药材的质量控制和评价提供实验依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　高效液相色谱仪（515型泵，2996光电二极管矩阵检测器，柱温箱，Empower中文色谱工作站，美国）； CP225D分析天平（德国Sartorius公司）；KS-1500超声提取仪器(宁波科盛仪器厂)。 　　1.2 试药 　　甲醇，色谱纯（上海陆忠试剂厂）；95 %乙醇，分析纯（江西同盟试剂厂）；水为高纯水；乌索酸和齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110742-200314、110709-200304，供含量测定用)。石榴皮，市售。 　　2 方法与结果 　　2.1 检测波长的选择取对照品和石榴皮样品溶液进样，使用PAD检测器在190～600 nm波长范围进行光谱扫描，流动相中乌索酸和齐墩果酸的紫外光谱吸收特征一致，最大吸收波长均为202.2 nm (见图1)。为了消除流动相在短波长处的末端干扰，提高信噪比，提取不同波长的色谱图进行比较，选择210 nm为检测波长时信噪比高，基线平稳。 　　2.2 色谱条件色谱柱：Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：甲