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磷脂转运蛋白基因探究进展 　关键字：磷脂转运 　　1973年，Kamp等人首次报道从牛肝组织中分离纯化得到参与脂蛋白之间磷脂酰胆碱（PC）转运的蛋白质，命名为磷脂酰胆碱转运蛋白（PCTP）。以后，磷脂酰肌醇转运蛋白（PITP）、鞘磷脂转运蛋白（SMTP）、非特异性脂质转运蛋白（nsLTP）等相继在不同物种中被发现证实，统称作磷脂转运蛋白（phospholipidtransferproteinPLTP）。到1991年，人们已经先后从哺乳动物、植物、真菌和细菌中纯化获得了十几种PLTP[12]。包括人类在内的许多动物血浆中均存在促进血浆脂蛋白间脂质转运和交换的特殊蛋白质，即脂质转运蛋白（lipidtransferproteinLTP）。其中，胆固醇酯转运蛋白（CETP）负责血浆中胆固醇酯（CE）和甘油三酯（TG）的转运，又称为LTP-1；PLTP则特异性地转运磷脂（PL），又称为LTP-2。LTP与其他脂蛋白代谢酶一起共同参与对脂蛋白代谢的调控，其发现打破并更新了传统的脂蛋白代谢理论，日渐成为脂蛋白领域中的研究热点。由于对PLTP的研究起步较晚，对它的认识远不如CETP深入，各项研究工作尚待开展。本文对近年来PLTP的研究进展作一简要综述。 　　一、理化特性PLTP和CETP均属于LTP/LBP（lipopolysaccharidebindingprotein，脂多糖结合蛋白）家族成员，该家族中还包括LBP和杀菌通透性增长蛋白（bactericidalpermeabilityincreasingproteinBPI）等功能相关的蛋白质。研究发现，人血浆PLTP在生化和遗传方面均不同于CETP。氨基酸序列分析显示，PLTP和CETP约有20%的氨基酸残基相同[3]。 　　血浆PLTP是一种疏水性糖蛋白，由476个氨基酸残基组成，其中疏水性残基较多。完整的人PLTPcDNA已经被成功地克隆，并从cDNA顺序推测出完整的氨基酸组成。PLTPcDNA共含1750bp，其中1518bp组成可读框，编码由17个氨基酸残基组成的信号肽和含476个氨基酸残基的成熟蛋白[4]。纯化的PLTP分子量约为81kD。实验结果显示，人的肺脏、脂肪、胎盘组织和睾丸中的PLTPmRNA水平较高，而脑、心脏、肌肉、肝脏中的水平依次逐渐降低。微血管系统、动脉和静脉内皮细胞中均有PLTPmRNA表达。 　　PLTP可转运含有两条酰基链和一个极性头部基团的多种脂质，对二酰基甘油、磷脂酚（PA）、鞘磷脂（SM）、磷脂酰胆碱（PC）、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇（PE）的转运能力依次逐渐减弱，对只有一条不饱合酰基链的PC转移率明显升高，而酰基链长度增加对转运的影响很小[5]。PLTP不但促进脂蛋白间PL的转运，还可增加胆固醇（Ch）转移。PLTP与Ch和PC等温平衡结合实验显示，与Ch相比，PLTP对PC有更高的亲和力和结合能力。当PLTP与不含Ch和PC小泡一起温育时，其结合PC的亲和力和容量更大。PC小泡可作为有过多表面外壳的脂解颗粒模型，用来研究PL向HDL的转移。深入研究发现，PCTP对底物的特异性高，只能转运PC；PITP优先转运磷脂酰肌醇（PI），也可转运PC；nsLTP的转运特异性不强，可转运PL、糖脂和Ch。PLTP分子上存在着与PC、Ch等被转运脂质结合的位点，通过载体介导机制发挥作用[6]。 　　二、编码基因的结构特点 　　人PLTP基因为单拷贝基因，定位于20q12-13.1，含16个外显子，15个内含子。人PLTP和CETP基因均源于LBP祖先家族，两者大部分的外显子长度相同，内含子/外显子的结构高度保守，并有着保守的功能区。LTP/LBP家族中除CETP位于16号染色体外，其他成员都位于20号染色体。小鼠PLTP基因定位于2号染色体，其结构与人的几乎完全相同，编码的氨基酸序列与人PLTP有83%的同源性[7]。 　　研究发现，PLTP基因DNA序列?30～159bp与启动子活性有关。进一步定点诱变分析提示，人PLTP基因中至少有三个转录必需的DNA序列，即与转录因子糖皮质激素受体（GR），激活蛋白2（AP-2）和刺激蛋白1（SP-1）的潜在结合位点。启动子中糖皮质激素效应元件（GRE）作为GR的结合位点，调控炎症反应中糖皮质激素诱导型基因的转录。已经证实，GRE与白介素1（IL-1）和白介素6（IL-6）等促炎细胞因子诱导HepG2细胞LBPmRNA的生成有关[8]。 　　大多数基因的主要转录调控元件位于编码序列5＇上游1kb的区域内，也有一些基因的调控元件位于结构基因3＇下游至少2kb内。另外，还有少数基因的调控元件存在于结构基因中，如载脂蛋白AⅡ(ApoAⅡ)基因内含子1中有调控转录的必需件。所以，不能排除PLTP基因转