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磷酸甘油酸变位酶活性测定方法建立 　【摘要】 目的 建立一种适用于生化自动分析仪动力学测定磷酸甘油酸变位酶（phosphoglyceromutase，PGAM）的方法并评价此方法的可靠性。为进一步探讨人体血清PGAM活性在急性心肌梗死和脑出血等疾病中的早期作用建立良好的方法基础。方法 PGAM活性测定采用3-磷酸甘油酸为底物，经烯醇化酶等一系列偶联，以340 nm波长在自动分析仪上测定，根据NADH吸光度变化可求出PGAM总活性。结果 通过一系列参数的测定建立了良好的能适应生化自动分析仪的PGAM活性测定方法。结论 全自动酶偶联法操作简单、测定快速、稳定性好，灵敏度和精确度高，抗干扰性强，可在全自动生化分析仪上应用。 【关键词】 磷酸甘油酸变位酶 心肌梗 脑出血 动力学法 Abstract：Objective To establish a method applicable to assay PGAM in an automatic biochemical analyzer dynamics and to evaluate the reliability of this method. To further explore the early role that human serum PGAM activity plays in acute myocardial infarction and cerebral hemorrhage, and other diseases and as a result find out a desirable method. Methods The activity was determined by 3 - phosphoglycerate as substrate, the enolase and a series of coupling to 340 nm wave-length automatic analyzer in the determination of total activity could be derived. Results Through a series of parameters determination, a good automatic biochemical analyzer to the PGAM assay was established.Conclusions Automatic-coupling method has the advantage of simplicity, fast-determination, good stability, high accuracy and sensitivity, and strong anti-interference, availability to the automatic biochemical analyzer. Key words： PGAM; myocardial infarction; cerebral hemorrhage; kinetic 磷酸甘油酸变位酶(Phosphoglyceric acid mutase，PGAM)广泛分布人体全身各组织器官，主要定位于细胞溶胶中。PGAM酶是糖代谢与分解酶系之一，所催化的反应是糖分解代谢中间环节，现知PGAM是不同基因指导合成的M和B亚基组成的二聚体。聚合成MM、BB、MB三型，MM主要存在于骨骼肌和心肌;BB型主要存在于脑、肝、肾和红细胞;MB型主要存在于心肌。MM、BB、MB分子量为60 000。所以建立一套能适用于生化自动分析仪，并能在临床上应用的动力学测定PGAM活性方法，对于临床实验诊断学有重要意义［1］。 1 材料与方法 1.1 试剂与仪器 1.1.1 R1 ：三乙醇胺-盐酸缓冲液(pH7.6，84 mmol／L)，1 mmol／L MgSO4，0.24 mmol／L NADH， 0.71 mmol／L ADP，0.12 mmol／L 2，3-二磷酸甘油酸，9.3 ku／L乳酸脱氢酶，1.4 ku／L丙酮酸激酶，1.4 ku／L烯醇化酶［2］。 R2：三乙醇胺-盐酸缓冲液(pH7.6，84 mmol/L) 4.8 mmol／L 3-磷酸甘油酸盐。 1.1.2 仪器 贝克曼SYNCHRON-LX20全自动生化分析仪［2］121-123。 1.2 实验对象 对照组为锦州市中心血站健康体检者，男50名，女50名；疾病组脑出血患者54名，急性心肌梗死患者。 1.3 实验方法 1.3.1 测定原理 3-PGAPGAM2-PGA烯醇