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神农香菊提取物高效液相色谱指纹图谱探究 　 作者：卢金清，詹晓莲，万威，徐玉婷，吴丹慧，曹儒宾，胡晓燕，何雪峰 【摘要】 目的建立神农香菊提取物黄酮类成分高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法采用反相高效液相色谱法， 色谱柱为DIONEX-ACCLAIM.120 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为 磷酸盐缓冲溶液（pH=2.5）-甲醇(梯度洗脱)；流速为0.8 ml/min；柱温35 ℃；检测波长350 nm。结果建立了神农香菊提取物黄酮类成分HPLC指纹图谱，标定了16个共有指纹特征峰，方法学考察符合指纹图谱技术要求。结论方法稳定，可靠，精密度高，重复性好，可为神农香菊提取物质量标准的制定提供科学依据。 【关键词】 神农香菊； 提取物； 高效液相色谱； 指纹图谱 　　Abstract：ObjectiveTo establish the HPLC fingerprint spectrum of flavonoids in extract of Dendranthema indicum. MethodsThe HPLC conditions with DIONEX-ACCLAIM 120 C18 column（250mm×4.6mm，5μm）was used， the mobile phase was composed of methy1 cyanide and pBS(pH=2.5) with gradient elution;flow rate was 0.5ml/min;column temperature was 35℃, the detection wavelength was 350nm, and the recording time was 140 min. ResultsTen common characteristic peaks were taken as fingerprint peaks and the prease and the ratest were in accordance with the requirement.ConclusionThe method is stable， reliable， precise and it provides a scientific basis for the quality standard of the extract of Dendranthema indicum. 　　Key words：Dendranthema indicum; Extraction; HPLC; Fingerprint Spectrum 　　神农香菊提取物为菊科植物神农香菊Dendranthema indicum (L．) Des Mon1．var．aromaticum Q.H.Liu et S．F．Zhang的干燥头状花序［1］经加工制成的提取物，具有疏风清热、平肝明目、散风降压的功效，其主要化学成分为黄酮类化合物，它可用于医药、饮料、香烟及化妆品等产业。文献报道未见神农香菊化学成分的指纹图谱研究。为了保证质量，本文采用高效液相色谱法，建立了神农香菊提取物黄酮类成分的指纹图谱。经过系统适用性试验和方法学考察，发现神农香菊提取物的指纹图谱具有系统性、全面性和特征性的特点，可以有效地鉴别神农香菊提取物，为全面评价和控制神农香菊提取物的质量提供了科学依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器DIONEXULTIMATE 3 000液相色谱仪，Starsorius BSI型电子分析天平（d=0.01 mg，北京赛多利斯天平有限公司），Up520H超声波清洗机（熊猫集团南京电子计量有限公司），DIONEXACCLAIM.120 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱。 　　1.2 试药甲醇（美国天地公司）为色谱纯，磷酸（上海振兴化工一厂）为分析醇，磷酸二氢钾（上海实验试剂有限公司），水为双蒸水。 　　1.3 对照品与供试药材木犀草素对照品（中国药品生物制品检定所，批号111520200201）；神农香菊提取物共10批，由10批神农香菊原药材制备，原药材经湖北中医学院中药鉴定教研室陈科力教授鉴定为菊科植物神农香菊Dendranthema indicum(L．)Des Mon1．var．aromaticum Q.H.Liu et S．F．Zhang.的干燥头状花序。见表1。 　　 　　2 方法和结果 　　2.1 色谱条件 DIONEXACCLAIM.120 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱；以磷酸缓冲盐水溶液（pH=2.5）为流动相A，以甲醇为流动相B，按表2进行梯度洗脱；流速0.5 ml/min；检测波长为350 n