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空心莲子草高效液相色谱指纹图谱探究
空心莲子草高效液相色谱指纹图谱探究
作者:范文乾,熊梦晓,李琼娅,艾伦强,潘晓云,刘焱文
【摘要】 目的 建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法,探讨不同国家和地区空心莲子草药材的品质差异。方法采用反相高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.12%磷酸水溶液系统,线性梯度洗脱,检测波长345 nm,进样量为10 μl。结果建立了空心莲子草药材的HPLC指纹图谱,确立了空心莲子草药材指纹图谱中的17个共有峰,计算了12批空心莲子草药材指纹图谱与对照图谱的相似度。结论所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于空心莲子草药材的质量控制。
【关键词】 空心莲子草; 高效液相色谱; 指纹图谱
Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC fingerprint analysis method of Alternanthera philoxeroides.MethodsChromatographic fingerprint of Alternanthera philoxeroides was investigated by RP-HPLC and the gradient elution mode was applied to chromatographic separation. Data were analyzed by fingerprint similarity evaluation software to compare the similarity of the samples.ResultsThe HPLC fingerprint of Alternanthera philoxeroides was established preliminarily. 17 characteristic peaks were selected and the similarity among 12 batches of Alternanthera philoxeroides from different aera have been determined.ConclusionHPLC fingerprint method is repeatable and can be used for the quality control of Alternanthera philoxeroides.
Key words:Alternanthera philoxeroides; HPLC; Fingerprint
空心莲子草Alternanthera philoxeroides (Mart.) Griseb.为苋科(Amaramthaceae)莲子草属多年生宿根草本。原产于南美洲,20世纪初期引种于我国,后逸为野生,现广泛分布于我国北纬44°以南、东经97°以东的海拔低且气候相对较暖湿的广大地区。空心莲子草药用全草,被广泛应用于民间。据《中药志》(第2版)记载:“空心莲子草性苦味寒,具有清热、凉血、解毒的功效,用于流感、麻疹、乙型脑炎、流行性出血热、疔疮、湿疹、毒蛇咬伤等。”国内对空心莲子草的研究工作刚刚开展,目前已知空心莲子草中主要含有甾体类、三萜类、黄酮类和蒽醌类等多种成分。本实验采用反相高效液相色谱法建立空心莲子草药材的指纹图谱分析方法,测定了国内10批药材的指纹图谱,并与美洲引种国内栽培的两个样品进行了比较。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Agilent 1100 Series高效液相色谱仪(G1322A脱气机,G1311A四元泵,G1316A柱温箱, G1314A紫外检测器)Agilent液相色谱工作站;METTLER TOLEDO AL204万分之一分析天平,KQ-250B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),HH-S型水浴锅(郑州长城科工贸有限公司)。
1.2 试药
乙腈(天津市科密欧化学试剂有限公司)、95%乙醇(上海振兴化工一厂)、乙醚(国药集团化学试剂有限公司)、醋酸乙酯(天津市化学试剂三厂)、甲醇(上海振兴化工一厂)均为分析纯,水为二次蒸馏水。
1.3 药材来源
实验用药材共计12批,其中10批来源于国内,由我室人员于2005年夏秋两季采自南方各省,取其地上部分,经湖北中医学院中药鉴定学教研室吴和珍副教授鉴定为苋科莲子草属植物空心莲子草的干燥全草;另有两批样品分别由阿根廷和美国引种,栽培于上海,由复旦大学生物多样性科学研究所潘晓云博士提供。所有药材的来源和采集日期见表1。表1 药材来源和采集日期(略)
2 方法与结果
2.1 色谱条件Alltima C
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