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细胞色素氧化酶P4502C19探究进展 　【摘要】 　　细胞色素氧化酶P4502C19(CYP2C19)又称S-美芬妥英羟化酶，其活性在人群分布中呈明显的遗传多态性。全文就近几年P4502C19的检测方法，基因多态性分子机制，基因多态性与药物和肿瘤易患性的关系等研究进展作一综述。 【关键词】 细胞色素氧化酶P4502C19　肿瘤　基因多态性 　　细胞色素P450是一组结构和功能相关的超家族基因编码的同工酶，在药物代谢中占有重要地位。大多数的药物进入体内后均需进行生物转化。生物转化主要包括Ⅰ相反应和Ⅱ相反应两个过程。Ⅰ相反应涉及的代谢酶主要为肝细胞内质网的细胞色素P450酶系。细胞色素氧化酶P4502C19（CYP2C19）又称为S-美芬妥英羟化酶，是细胞色素P450的一个成员，其活性存在明显的个体差异，影响许多临床药物的代谢，对不同个体的药物治疗作用和不良反应及药物的毒性产生重要影响。文章介绍CYP2C19的研究进展。 1 CYP2C19研究的历史回顾 CYP2C19存在于肝微粒体中,位于染色体10q24,由490个氨基酸组成，分子量为55 933，其中全部顺序包括9个外显子和5个内含子，序列已清楚。在研究美芬妥英的4′-羟化作用发现了CYP2C19的药物遗传作用，呈现明显的遗传多态性，其遗传为常染色体隐性遗传。美芬妥英（mephenytoin,MP）系抗癫痫药，是由S-和R-两种对映体组成的混旋体。Shimada等首先从人肝微粒体中分离出两个电泳纯的美芬妥英酶，分别被命名为P450MP-1和P450MP-2,它们表现出较强的S-美芬妥英4′-羟化反应。1989年Guengrich等分离出P450MP-3，其催化S-美芬妥英羟化活性甚低，但分子量、对抗P450MP抗体的反应性等方面均与P450MP-1一致。随着分子生物学技术的发展，一致认为P450MP属于P4502C基因亚群。1993年Wrighton 等首次证明了CYP2C19的表达及其在S-美芬妥英4′-羟化代谢中的作用。继后Goldstein等用人肝样本进行免疫斑点分析，进一步证实了S-美芬妥英的活性和人肝中CYP2C19含量相关，与肝中的CYP2C9，CYP2C10和2C8含量不相关。在此基础上，Moraist证实CYP2C19基因是决定S-美芬妥英羟化代谢的决定基因，该基因的突变是导致S-美芬妥英羟化代谢多态性的分子机制。 2 检测方法 一般从表型分析和基因分型检测CYP2C19的多态性，常规体外检测药物代谢是否存在着遗传多态性的方法称为表型分析。目前常用S-美芬妥英作为探针药物，采用口服美芬妥英外消旋体,收集服药后一定时间内的尿样,测定尿中对映体S-和R-美芬妥英浓度，计算S/R值。一般认为S/Rlt;0.95为强代谢者（EM）,S/Rgt;0.95为弱代谢者（PM）。采用美芬妥英作探针药物的不足是尿中的S/R的稳定性不好，有副作用等。Chang M等[1]用奥美拉唑作为表型分析的药物，发现与服用美芬妥英后S/R高度相关（rs=0.63，Plt;0.001）。缺点为没有最佳的奥美拉唑服用剂量和采样时间，在非健康人群中，表型与基因分析结果不一致[2] 。Hoskins JM等[3]用氯胍作为探针药物，以代谢比率（氯胍/环氯胍）为指标来分型，结果与基因分型一致。此法用尿样，简便易行。但也有相反结果，Funck-Brentano C等[4]发现受试者服用氯胍后的氯胍/环氯胍与服用美芬妥英后S/R不相关，以上表明，首选的CYP2C19探针药物尚未清楚。 如前所述，表型分析结果可直观地反映出受试者对某些药物在体内代谢快慢程度，但表型分析易受病人状态和合并用药干扰和医学伦理的限制。基因分型是一种基于DNA的等位基因PCR、限制性片段长度多态性分析(RFLP)及基因测序技术的方法,可以用于快速、准确地诊断出有药物代谢酶活性异常(提高或缺乏)的患者。PCR/RFLP的方法是通过设计特异性引物进行反应，然后用内切酶消化产物，根据酶切位点的消失与否来判断等位基因的点突变。ASA-PCR不要内切酶消化。其基本原理是设计两个引物，其3＇端一个与野生型碱基配对，另一个与突变型碱基配对，分别与另共用引用引物构成反应体系。反应时野生型模板阻碍突变型引物的放大，反之亦然。最后观察电泳胶上扩增与否，即可直接鉴定等位基因的点突变类型（野生型、杂合型或突变型）。上述基因分型的DNA来源一般采用血样，但血样来源不易，取样和运输过程操作复杂。Tanigawara等[5]研究发现，从头发、口腔唾液、手指甲非血标本中提取DNA，虽然所获得的DNA量少，但也足够进行ＰＣＲ/ＲＦＬＰ，所获得的CYP2C19基因分型结果与从血样提取的DNA进行CYP2C19基因分型的结果一致。 3 CYP2C19与药