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细胞角蛋白在正常皮肤组织中表达 　 作者：孙 莉，李 红，刘淑梅，徐志秀 【摘要】 目的 观察7种细胞角蛋白（cytokeratins，CK）在正常皮肤组织的表达，并探讨其意义。方法 应用免疫组织化学S-P法对20例不同部位的正常皮肤组织进行CK7（K72.2）、CK8（C-51）、 CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、 CK17（E3）、 CK18（DC10）、 CK19（KS19.1）标记，观察不同细胞角蛋白的表达情况。结果 在正常皮肤上皮组织中，7种细胞角蛋白的表达和分布有所不同。结论 有选择地检测一组CK的联合表达，有助于各种皮肤上皮组织的识别。 【关键词】 细胞角蛋白；皮肤；免疫组织化学 【Abstract】 Objective To observe immunohistochemical expression of seven cytokeratins on skin and to assess its diagnostic value.Methods Immunohistochemical markers，including CK7（K72.2），CK8（C-51），CK10（DE-K10），CK14（LL002），CK17（E3）， CK18（DC10）and CK19（KS19.1） were used by S-P immunohistochemical staining methods. The expression of cytokeratins was observed.Results The expressions and distributed patterns of 7 cytokeratins were differentiated on normal skin epithelial tissues of 20 cases.Conclusion Comprehensive analysis of a selective cytokeratin group， can assist distinguished of various skin epithelial tissues. 【Key words】 cytokeratins；skin；immunohistochemistry 哺乳动物的细胞质含有复杂的细胞骨架蛋白，包括微丝、微管和中间丝。中间丝有细胞角蛋白Ⅰ、细胞角蛋白Ⅱ、结蛋白、波形蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经纤维等6种。上皮细胞胞质中的骨架蛋白除微丝（肌动蛋白）、微管蛋白外，主要是细胞角蛋白（cytokeratins，CK）。CK是上皮细胞的特征性标记物，由生物化学和免疫学方法根据CK分子量的不同，分为20种，是一个庞大复杂的家族。不同类型的上皮细胞和同类型上皮细胞的不同分化阶段，表达不同的CK。当上皮组织发生瘤变甚至癌变后，仍然表达与正常组织基本相同的CK类型。皮肤的上皮性肿瘤，包括表皮和皮肤附属器肿瘤，类型繁多，组织形态复杂，有时鉴别诊断十分困难。研究不同CK在正常皮肤组织的表达，可能对表皮和皮肤附属器肿瘤的诊断具有一定价值。 1 材料与方法 1.1 材料 所有正常皮肤的研究标本均来自胜利油田中心医院2003～2004年收检的病例，包括5例乳腺癌根治手术切除标本中远离肿瘤的胸部皮肤，5例直肠癌手术切除标本远离肿瘤的肛旁皮肤和10例不同部位的色素痣切除标本的切缘皮肤。 1.2 试剂 第一抗体为7种不同的细胞角蛋白单克隆抗体，包括CK7（K72.2）、CK8（C-51）、 CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、CK17（E3）、CK18（DC10）、CK19（KS19.1），均为工作液；免疫组织化学检测系统采用过氧化物酶标记的即用型UltraSensitiveTM S-P试剂盒；显色试剂为高敏感二氨基联苯胺（DAB）显色试剂盒。以上试剂购自福州迈新生物技术开发有限公司。 1.3 方法 复查胜利油田中心医院2001～2004年收检的所有皮肤上皮性肿瘤病例的存档切片，从中选取所有皮肤附属器肿瘤及部分皮肤癌病例为研究对象。对存档蜡块重新切片，进行免疫组织化学染色。抗原修复，CK7标记皮肤附属器肿瘤采用胰酶消化法，胰酶浓缩液和稀释液1∶3混匀，滴片后37℃孵育15min；CK8、CK10、CK14、CK17、CK18、CK19等6种抗体染色标记的切片，采用柠檬酸缓冲液高温高压法，高压锅内置pH 6.0的0.01mmol/L柠檬酸缓冲液，加热至沸腾，放入切片，密闭高压锅继续加热，喷汽后2min停止。S-P法免疫组化标记，DAB显色。以PBS代替一抗做空白对照。 1.4 结果判定 所有免疫组化染色结果在光镜下进行观察和评判。