肝豆汤对肝豆状核变性皮肤成纤维细胞模型铜代谢影响.doc

肝豆汤对肝豆状核变性皮肤成纤维细胞模型铜代谢影响 　　　提要　目的：在细胞水平探讨中药复方肝豆汤肝豆状核变性的机理。：通过建立23例肝豆状核变性皮肤成纤维细胞模型，观察加入含肝豆汤兔血清前后细胞内Cu2＋、Zn2＋等微量元素含量的变化。结果：加入含肝豆汤兔血清前与加入24h后相比较，细胞内铜含量从(80.94±34.76)ng/mg，减少到(46.90±22.14)ng/mg(P＜0.01)，细胞内锌含量从(140.43±33.81)ng/mg，增加到(151.43±37.83)ng/mg(P＜0.01)。结论：肝豆汤具有显著的细胞内排铜作用和使细胞内锌含量增加的作用。 Effect of Gandou Decoction on Copper Metabolism of Skin Fibroblast of Hepatolenticular Degeneration Model; ;;　　Objective: To explore the cytological mechanism of Gandou Decoction (GDD) in treating hepatolenticular degeneration (HLD).Methods: Twenty-three in vitro models of cultured skin fibroblast of HLD were established to observe the intracellular change of microelements (Cu2＋， Zn2＋, etc.) content before and after adding rabbit′s serum containing GDD.Results: After being treated with GDD contained serum for 24 hours, the intracellular content of Cu2＋ decreased from (80.94±34.76) ng/mg to (46.90±22.14) ng/mg, P＜0.01, while that of Zn2＋ increased from (140.43±33.81) ng/mg to (151.43±37.83) ng/mg, P＜0.01.Conclusion: GDD is quite effective in removing the intracellular copper and increasing the intracellular zinc. 毕业论文 　　Key words　hep atolenticular degeneration, Gandou decoction, model of cultured skin fibroblasts of hepatolenticular degeneration, rabbit serum containing Gandou decoction, intracellular contents of copper and zinc 　　肝豆状核变性(HLD)又称Wilson病，是一种常染色体隐性遗传性铜代谢障碍疾病。本病由于铜离子缓慢地在肝、脑、肾等全身各器官广泛沉积，出现锥体外系及肝症状等复杂多样的临床表现。因此HLD患者须终身使用驱铜药物以纠正体内Cu2＋离子的正平衡。国内外使用的青霉胺等驱铜药物虽可获得一定疗效，但有较多的近期或远期毒副作用，使部分患者被迫放弃长期维持治疗。杨任民等于70年代首创中药复方肝豆汤治疗HLD，初步获得了较好的排铜效果，且在20余年的临床中不断合理调整组方，取得了较为满意的临床疗效(1，2)。本通过以HLD患者皮肤制备的HLD皮肤成纤维细胞模型(以下简称细胞模型)中加入含肝豆汤兔血清(以下简称含药血清)，观察加入含药血清前后细胞模型中铜、锌等微量元素含量的变化，以探讨肝豆汤在细胞水平的排铜效果，进一步阐明肝豆汤的排铜机理。 　　材料与方法 　　1　材料　随机选取临床表现及铜代谢检查全部符合诊断标准(3)的23例HLD住院患者。其中男18例，女5例；年龄8～40岁，平均(22.43±9.19)岁。随机选取雄性成年新西兰白兔10只，体重(3.0±0.1)kg。实验动物由安徽医科大学实验动物中心提供。 毕业论文 　　2　方法 　　2.1　含药血清制备　按肝豆汤组方(大黄8g黄连10g　黄芩10g　半枝莲15g　泽泻15g　鱼腥草15g)分别准确称取大黄等6味中药煎煮，制备成不含大黄或仅含大黄或含大黄的肝豆汤分别用真空冷冻干燥系统浓缩至各约150ml。以肝豆汤中的君药大黄的有效成分之一大黄酚为