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脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠保护作用 　【摘要】 目的研究脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠的保护作用。方法采用结扎双侧颈总动脉制作不完全脑缺血损伤大鼠模型，连续给药30 d后，进行血液流变学、脑组织丙二醛（MDA）与一氧化氮（NO）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力的检测，并观察海马神经元、神经胶质细胞与微血管内皮细胞超微结构的变化。结果与假手术组比较，不完全脑缺血损伤大鼠全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数明显升高，脑内MDA、NO含量明显升高，SOD活力明显下降，海马神经元、神经胶质细胞与血管超微结构发生明显改变。脑力智宝能显著降低全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数、脑组织内MDA、NO含量，提高SOD活力，并明显改善海马神经元、神经胶质细胞与血管超微结构的损伤。结论脑力智宝对脑缺血损伤具有保护作用，其作用机制可能与其促进血液循环，改善血液流变性，减轻自由基损伤，从而改善脑组织的超微结构有关。 【关键词】 脑力智宝 脑缺血 超微结构 血液流变学 自由基 脑力智宝主要由当归、红花、远志、石菖蒲、黄精、益智仁、龟甲、枸杞子等组成，用于治疗精神发育迟滞、脑瘫、癫痫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍，具有一定的疗效。临床研究表明脑力智宝能明显改善脑梗塞后遗症患者运动、语言及精神方面的症状［1］。本实验观察了脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠的保护作用，旨在阐明脑力智宝用于治疗脑缺血损伤性疾病后遗症的机理。 　　1 材料与仪器 　　1.1 动物与分组 Wistar大鼠，体重220～250 g，雌雄各半，广州中医药大学实验动物中心提供。 　　1.2 药物 脑力智宝由广东高明脑病医疗医药研究院提供，制备成1 g生药/ml供试液，灌胃前按所需浓度稀释。尼莫地平（nimodipine, Nim）片剂，德国拜耳公司产品，批号CAGFT3。 　　1.3 试剂与仪器 丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）与总蛋白试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。722光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂产品；LBY-NM微量血浆粘度计，LBY-N6A型旋转式血液粘度计，北京普利生精密仪器研究中心产品；JEM-1200EX透射电子显微镜，日本JEOL公司产品。 　　2 方法 　　2.1 不完全脑缺血损伤模型的制备［2］大鼠经10%乌拉坦1 g/kg腹腔注射麻醉后，仰卧位固定，行颈正中切口，分离双侧颈总动脉，用丝线结扎，缝合皮肤。假手术组大鼠同法分离双侧颈总动脉，但不结扎。 　　2.2 分组与给药 将造模成功动物随机分为3组：模型组、尼莫地平组、脑力智宝组，每组8只，雌雄各半。假手术组大鼠8只，雌雄各半。待大鼠苏醒后，尼莫地平组按12 mg/kg灌胃给予尼莫地平混悬液，脑力智宝组按8 g/kg灌胃给予脑力智宝供试液，假手术组和模型组分别给予等容量生理盐水，1次/d，连续30 d。 　　2.3 血液流变学及生化指标测定 连续给药30 d后，每组各取6只，眼内眦静脉取血3 ml，进行血液流变学测定。麻醉下处死，快速断头取脑，脑组织用预冷的生理盐水制成1∶10（W/V）的匀浆，3 000 r/min离心10 min，取上清液，依照试剂盒说明书检测SOD活力及MDA、NO及组织蛋白含量。 　　2.4 电镜观察 每组剩余的两只大鼠，腹腔注射乌拉坦麻醉后，剪开胸腔，暴露心脏，先以100 ml生理盐水经主动脉冲洗，然后灌注由2%多聚甲醛和2.5%戊二醛组成的4℃ 0.1 mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.4)300 ml，取脑背侧海马CA1区组织1.0 mm×1.0 mm×1.0 mm。常规电镜样品制备程序漂洗、脱水、浸透及环氧树脂包埋，超薄切片后，将切片捞至载网上，干燥后行铅铀双染，透射电镜观察超微结构的改变。每个标本观察神经元、胶质细胞与血管的病理变化，并进行拍摄。 　　2.5 统计学方法 实验数据用±s表示，运用统计软件SPSS for windows 11.5 进行单因素方差分析。 　　　3 结果 　　3.1 脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠血液流变学的影响不完全脑缺血损伤大鼠全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数均较假手术组明显升高（Plt;0.05或Plt;0.01），红细胞压积则无明显变化。尼莫地平与脑力智宝能显著降低全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数（Plt;0.05或Plt;0.01），对其它指标则影响不显著（Pgt;0.05），结果见表1。 　　表1 脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠血液流变学的影响（略） 　　与模型组比较，*Plt;0.05,**Plt;0.01；n=6 　　3.2 脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠脑组织内M