谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸条件的优化-南京农业大学学报.PDFVIP

南京农业大学学报摇 2009,32 (3): 135 138 摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ / nauxb郾njau郾edu郾cn 朱文娴, 房婉萍, 成浩, 等. 谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸条件的优化 [J]. 南京农业大学学报,2009, 32(3): 135 138 谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸条件的优化 1,2 1 2* 2 1* 3 朱文娴 , 房婉萍 , 成浩 , 王丽鸳 , 黎星辉 , 徐玉琴 (1. 南京农业大学茶叶科学研究所, 江苏 南京 210095;2. 中国农业科学院茶叶研究所, 浙江 杭州 310008; 3. 溧阳市天目湖茶叶研究所, 江苏 常州 213335) 摘要: 在不同诱导条件下, 对谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸体系进行优化, 确定最适诱导表达条件, 为微生物发酵合 成茶氨酸提供技术依据。 研究结果表明: 基因工程菌最佳培养温度为30 益, 最佳诱导剂异丙基硫代 茁 D半乳糖苷浓 -1 -1 度为0郾1mmol ·L , 最佳诱导温度为28 益。 合成茶氨酸的最适pH值为9郾5, 适合的缓冲液为100 mmol ·L 咪唑; 反 应体系中咪唑缓冲液优于磷酸钾缓冲液; 低浓度L 谷氨酸钠、 高浓度盐酸乙胺和高浓度三磷酸腺苷对茶氨酸的合成均 有一定的促进作用, 可以提高茶氨酸的生成量。 关键词: 谷氨酰胺合成酶; 茶氨酸; 表达; 生物合成 中图分类号: S571郾1摇 摇 摇 文献标志码: A摇 摇 摇 文章编号: 1000 2030 (2009) 03 0135 04 Optimization of theanine biosynthesis catalyzed by glutamine synthetase 1,2 1 2* 2 1* 3 ZHU Wen鄄xian , FANG Wan鄄ping , CHENG Hao , WANG Li鄄yuan , LI Xing鄄hui , XU Yu鄄qin (1. Tea Research Institute, Nanjing Agricultural University, Nanjing210095, China; 2. Tea Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Hangzhou310008, China; 3. Tea Research Institute of Tianmu Lake in Liyang, Changzhou213335, China) Abstract: Theanine biosynthesissystemcatalyzedby glutamine synthetasewasoptimized. Thisworkaffordedanecessarytechnical foundation for theanine biosynthesized by microbe zymolysis. The results were as follows, the optimum temperature for bacterium -1 culturewas30 益, the optimum IPTG (isopropylthio鄄茁鄄D鄄galactoside